ГОСТ 32042— 2012
Цветную реакцию проводят в восьми пробирках с притертыми пробками:
- в пробирку 1 вносят 5 см3дистиллированной воды (контроль на реактивы);
- в пробирки 2-4 вносят по 5 см3рабочего стандартного раствора витамина В5(см. 9.3.6);
- в пробирки 5. 6 вносят по 5 см3полученного фильтрата;
- в пробирки 7. 8 вносят по 5 см3 полученного фильтрата с поправкой на аминореагирующие
вещества.
Все пробирки, кроме 7. 8. помещают на 5 мин в водяную баню при тем-пературе (50 ± 2) °С. По
сле этого в пробирки 7. 8 вносят по 2 см3дистил-лированной воды, а во все остальные пробирки - по
2 см3 роданбромидного раствора (см. 9.3.4) в вытяжном шкафу. Пробирки закрывают пробками,
перемешивают и помещают в водяную баню при температуре (50
±
2) °С на 10 мин. По истечении
этого времени пробирки вынимают, охлаждают водой до комнатной температуры и ставят на 10 мин в
темное место. Затем в каждую пробирку приливают по 3 см3раствора метола (см. 9.3.2). перемеши
вают и оставляют на 1 ч в темном месте при комнатной температуре. По истечении этого времени
растворы фильтруют через бумажный складчатый фильтр, если они мутные, и колориметрируют на
фотоэлектроколориметре (синий светофильтр) или спектрофотометре при длине волны 400-440 нм в
кювете толщиной поглощающего свет слоя 10 мм относительно дистиллированной воды.
9.5
Обработка результатов
Массовую долю витамина В5в премиксе.
X.
г/т. вычисляют по формуле
(А-Л,)-У-Уг-У4-т; -
КГ6
(
А
,-
А
,
)
-
т V
,
V
,
V<
10-*
(
6
)
где
А. А :-
оптические плотности анализируемых растворов 5. 6 и растворов
7. 8 соответственно (среднеарифметические значения двух определений), е.о.п. или мм;
V
- объем падролизата. см3;
V2
- объем разведенного фильтрата, см3:
Vi -
объем раствора после обработки сернокислым цинком, см3;
т\ -
масса витамина В5в измеряемом рабочем стандартном растворе, мкг;
А2
- оптическая плотность стандартных растворов 2. 3. 4 (средиееарифметическое значение
трех определений), е.о.п. или мм;
А3- оптическая плотность раствора
1,
е.о.п. или мм.
т -
масса анализируемой пробы премикса, г;
V, - объем фильтрата, взятый на разведение, см3;
V3-
объем гидролизата, взятый на обработку сернокислым цинком, см3;
Vs
- объем фильтрата, взятый для проведения цветной реакции, см3;
10 6- коэффициенты пересчета микрограммов в граммы и граммов втонну.
Вычисления проводят до первого десятичного знака с последующим округлением до целого числа.
За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение двух параллельных
определений, выполненных в условиях повторяемости и удовлетворяющих условию приемлемости
11.1 настоящего стандарта.
10 Определение содержания витамина В5 (никотиновой кислоты) методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии
10.1 Сущность метода заключается в экстракции витамина В5(никотиновой кислоты) из анализи
руемой пробы премикса раствором соляной кислоты и последующем определении его содержания с
помощью жидкостного хроматографа.
Метод применим в диапазоне измерений содержания витамина В5в премиксе от 200 до 4000 г/т.
10.2 Метод с использованием раствора соляной кислоты молярной концентрации c(HCI) =
0.01 моль/дм3
10.2.1 Средства измерений, оборудование, материалы и реактивы
Хроматограф жидкостный, укомплектованный спектрофото-метрическим детектором, пригодным
для измерения оптической плотности в диапазоне длин волн от 200 до 300 нм. самописцем или инте
гратором. позволяющим измерять высоту и площадь пиков, и компьютером с установленным про
граммным обеспечением для обработки результатов измерений. Допускается использовать детектор
при постоянной длине волны 254 нм.
12