ГОСТ 32042— 2012
промывают, прокачивая через нее 150-200 мм5элюента до выхода на нулевую линию.
Значения средних высот хроматографических пиков (в единицах оптической плотности, е. о.
п., или в миллиметрах) откладывают по оси ординат градуировочного графика, а по оси абсцисс -
массы витамина В5в 50 см3 раствора.
Построение градуировочных графиков можно заменить расчетом коэффициента наклона
К.
мкг/е.о.п. или мкг/мм. по формуле
±*.
К = —
----,(8)
п
где
п -
количество точек, по которым строится градуировочный график;
К,
- коэффициент наклона градуировочного графика для /-го градуиро-вочного раствора,
мкг/е.о.п. или мкг/мм.
Значение коэффициента наклона градуировочного графика
для i-го
градуировочного раствора
К,,
мкг/е.о.п. или мкг/мм. вычисляют по формуле
(9>
где С,- содержание витамина в соответствующем /-ом градуировочномрастворе. мкг;
h,
- высота /-го хроматографического пика, е.о.п. или мм.
10.3.2.5 Проверка градуировочного графика
Градуировочный график контролируют не реже 1 раза в неделю. Для этого проводят процедуру
построения градуировочного графика по 10.3.2.4 для 1-2 рабочих стандартных растворов витамина В5.
Отклонение полученных результатов от измеренных в момент построения градуировочного
графика а. %. определяют по формуле
о
= ——— —— •100.(10)
А.
где ft,.
h2
- высоты хроматографических пиков, определенные при построении градуировочного
графика и в момент проверки соответственно, е. о. п. или мм;
100 - коэффициент пересчета в проценты.
При отклонении результатов более чем на 5 % строят новый градуиро-вочный график.
10.3.3 Проведение испытания
10.3.3.1 Проведение кислотного гидролиза
1-5 г анализируемой пробы премикса, взвешенную с погрешностью
±
0.001 г. помещают в
коническую колбу вместимостью 100 см3 и добавляют 30 см3 раствора соляной кислоты молярной
концентрации с(НС1) = 0,1 моль/дм3. Колбу нагревают на водяной бане при температуре (75 ± 1) вС в
течение 10 мин. затем охлаждают под струей холодной воды, добавляют 1-2 капли спиртового
раствора фенолфталеина с массовой долей 1 % и раствор гидроокиси натрия с массовой долей 40 % до
образования розового окрашивания. Избыток щелочи нейтрализуют раствором серной кислоты
молярной концентрации
с(’Л
H2S04) = 5 моль/дм3. Выдерживают раствор 10 мин, фильтруют через
обеззоленный фильтр с синей лентой в мерную колбу вместимостью 50 см3 и доводят объем до
метки дистиллированной водой.
10.3.3.2 Хроматографирование
Полученный экстракт хроматографируют, по 10.3.2.4. Для определения содержания витамина В5
в премиксах проводят два параллельных определения, начиная со взвешивания анализируемой про
бы. Каждый экстракт хроматографируют два раза, находят средне- арифметическое значение
высоты пиков в единицах оптической плотности или миллиметрах и по градуировочному графику
определяют содержание витамина Вс.в микрограммах (см. приложение А. рисунок А.4).
10.3.4 Обработка результатов
Массовую долю витамина В5в премиксе. X.
г/т,
вычисляют по формуле
т,
-Ю’6
"
т ■
К) 6 ’
(
11
)
16