Приложение А
(обязательное)
ГОСТ 28038-2013
Порядок градуировки спектрофотометра для определения патулина мето
дом тонкослойной хроматографии
Для определения массовой концентрации патулина в градуировочном (основном) растворе
готовят растворы двухромовокислого калия с(К2Сгг07) = 0.25 • 10‘3моль/дм3, с (К2Сг20г) = 0,125 • 10 ^
моль/дм3, с (K2Cr2O7)=0.625 103моль/дм3в растворе серной кислоты с (7г НгБОд) = 0,018 моль/дм3.
Раствор серной кислоты готовят следующим образом. В мерную колбу вместимостью 2000
см3пипеткой вносят 1 см3серной кислоты и доводят объем водой до метки. (Допускается использо
вать мерную колбу вместимостью 1000 см3, соответственно уменьшив вдвое объем серной кислоты).
Градуировочный раствор с (ЮСггО?) = 0,25 • 10 3 моль/дм3 готовят следующим образом: 78 мг двух
ромовокислого калия вносят в мерную колбу вместимостью1000 см3, растворяют в 100 - 200
см3 раствора серной кислоты и доводят до метки раствором серной кислоты той же концентрации.
Содержимое колбы тщательно перемешивают. Остальные калибровочные растворы готовят точным
разведением первого раствора в два и в четыре раза раствором серной кислоты.
Определяют оптическую плотность каждого раствора в кювете с рабочей длиной 1 см на спек
трофотометре при длине волны 350 нм. В качестве контрольного раствора используют раствор сер ной
кислоты. По полученным значениям оптической плотности для каждого раствора вычисляют зна чение
молярного показателя поглощения (Е), дм3моль 1см1, по формуле
Е
D
(А.1)
с Г
где D - оптическая плотность калибровочного раствора;
с - молярная концентрация двухромовокислого калия в растворе, моль/дм3;
/ - рабочая длина кюветы, см.
По полученным значениям рассчитывают среднеарифметическое значение молярного пока
зателя поглощения (Е) и вычисляют поправочный коэффициент (К2) для спектрофотометра по фор
муле
К ;(А.2)
где Ес- стандартизированное значение молярного показателя поглощения;
Ес = 3160 дм3- моль 1см ’.
15