ГОСТ 28038-2013
К экстракту добавляют пять капель уксусной кислоты, смесь перемешивают и выпарива
ют на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °С в остродонной колбе до объема
около 0.5 см3. Полученный таким образом раствор количественно переносят в виалу объемом 2
см3 с помощью автоматической пипетки. Отгонную колбу ополаскивают двумя порциями
этилацетата объемом около 0.2 см3 каждая, смывы переносят в ту же виалу. Содержимое
виалы выпаривают досуха в токе азота при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в
0.050 см3 ацетонитрила, отмеренных автоматической пипеткой, и переносят во вставку для
микроколичеств по 6.2. Полученный раствор используют для хроматографического анализа.
Важно: Очистку этилацетатного экстракта раствором карбоната натрия проводят как можно
быстрее {не более 0.5 мин) из-за нестабильности патулина в щелочной среде.
6.4.3. Приготовление раствора пробы для хроматографического анализа при испытании
фруктовых и овощных соков и сокосодержащих напитков с мякотью.
6.4.3.1 Экстракция
Пробу для анализа массой 5,00 г помещают в центрифужную пробирку с завинчивающейся
крышкой вместимостью 15 см3. В пробирку добавляют порцию этилацетата объемом 5,0 см3. Пробир ку
завинчивают крышкой и встряхивают в течение 1 мин., после чего пробу центрифугируют при цен
тробежном ускорении не менее 990 g в течение 10 мин. Затем в стакан вместимостью50 см3акку
ратно сливают верхний слой, не затрагивая мякоть на границе разделения слоев. Экстракцию повто
ряют еще два раза, приливая каждый раз по 5 см3этилацетата с последующим центрифугированием.
Этилацетатные фазы объединяют.
6.4.3.2 Очистка экстракта
Объединенный экстракт переносят в делительную воронку и проводят очистку по процедуре,
описанной в 6А2.2.
6.4.4Приготовление раствора пробы для хроматографического анализа при испыта
нии концентрированных фруктовых и овощных соков
6.4.4.1 Концентрированные соки различных фруктов, ягод и овощей разбавляют дистиллиро
ванной водой в пять раз весовым методом. Для этого взвешивают ориентировочно 5 - 7 г концентри
рованного сока с точностью до второго десятичного знака и доводят дистиллированной водой массу
раствора пробы до 25 - 35 г. взвешивая полученный раствор также с точностью до второго десятич
ного знака. Делением общей массы на массу навески концентрированного сока вычисляют коэффи
циент разбавления К, который учитывают при дальнейших вычислениях. Далее проводят все проце
дуры. описанные в 6.4.2 или 6.4.3, при этом пробу для анализа отбирают по массе.
6.4.5 Хроматографический анализ
Проводят хроматографический анализ раствора пробы, приготовленного по 6.4.1 - 6.4.4 при
условиях по 6.3.5. Пик патулина идентифицируют по совпадению его времени удерживания со време
нем удерживания пика патулина на хроматограмме градуировочного раствора. С помощью градуиро
вочной характеристики определяют массовую концентрацию патулина в растворе пробы для анализа.
Если массовая концентрация патулина в растворе пробы для анализа превышает верхнюю границу
диапазона градуировки, анализируемый раствор разбавляют ацетонитрилом и проводят его повтор
ный анализ.
П р и м е ч а н и е - Примеры хроматограмм патулина приведены на рисунках Б.1 - Б.4
приложения Б.
6.5Обработка и оформление результатов определения
6.5.1 При приготовлении раствора пробы для анализа по 6.4.1 массовую долю патулина Х\, %
вычисляют формуле
т,
X,
С У,
V
V,
•10 ’ *
(7)
гдеС -массовая концентрация патулина в растворе пробы для анализа, определен
ная по 6.4.5. мкг/см3;
V\ - общий объем водной вытяжки, приготовленной по 5.4.1, см3:
V
2
- объем водной вытяжки, взятый для экстракции по 5.4.2. см3;
Vi - объем, в котором сконцентрирован экстракт после очистки по 5.4.3, см3:
т - масса пробы для анализа, г.
11