ГОСТ 28038-2013
6 Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)
6.1 Сущность метода
Метод ВЭЖХ основан на экстракции патулина из исследуемой пробы этилацетатом, очистке
экстракта перераспределением в водный раствор карбоната натрия, переэкстракции, концентрирова
нии и количественном анализе экстракта с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жид
костной хроматографии (ВЭЖХ) со спектрофотометрическим детектированием.
Диапазон измерений массовой концентрации патулина методом ВЭЖХ составляет от 10.0
мкг/дм3 до 75.0 мкг/дм3, массовой доли - от 1 0 Ю Т % до 75-10 7 %. В интервале массовых
концентраций от 1.0 до 10.0 мкг/дм3- концентрация патулина находится в следовых количествах.
Предел обнаружения патулина методом ВЭЖХ составляет 1 мкг/дм3или 1•107%.
6.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы, мате
риалы
Хроматограф жидкостный в составе насоса высокого давления с диапазоном регулировки
скорости потока подвижной фазы 0.1 - 5.0 см3/мин. устройства дегазации подвижной фазы, устрой
ства ввода пробы, спектрофотометрического детектора, пригодного для регистрации аналитического
сигнала при длине волны 275 нм или спектрофотометрического детектора с диодной матрицей в ра
бочем диапазоне от 190 до 600 нм, компьютеризованной системой регистрации и обработки анали
тического сигнала, обеспечивающий относительное среднеквадратическое отклонение при измере
нии площади пика не более 4 %, относительное среднеквадратическое отклонение при измерении
времени удерживания не более 0.5 % и предел обнаружения по антрацену не более 0.01 мкг/см3.
Колонка аналитическая длиной от 150 до 250 мм, внутренним диаметром от 3,0 до 4.6 мм. за
полненная сорбентом на основе силикагеля, модифицированного фенильными группами1*, частицами
сферической формы диаметром 5 мкм, в комплекте с предколонкой, заполненной тем же сорбентом,
обеспечивающая отделение пика патулина от остальных компонентов матрицы пробы.
Весы лабораторные среднего класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г с
пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ± 0,01 г.
Посуда мерная лабораторная стеклянная по ГОСТ 1770:
цилиндры 1-50-2, 1-100-2 и 1-1000-2;
колбы мерные 4-50-2,4-100-2, 4-250-2, 4-500-2 и 4-1000-2;
пробирки 1-10-0,1 ХС и 1-20-0,1 ХС;
Пипетки градуированные 1-2-2-1, 1-2-2-2.1-2-2-5 и 1-2-2-10 по ГОСТ 29227.
Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336:
стаканы В-1-50 и В-1-100;
воронки лабораторные В-56-80 ХС;
колба плоскодонная П-2-250;
колба грушевидная Гр-100-14/23;
колба остродонная 0-25-14/23.
Центрифуга лабораторная с величиной фактора разделения (д-фактор) 800 - 1000 и с цен
трифужными коническими градуированными пробирками вместимостью 15 см3 с завинчивающейся
крышкой.
Фильтры мембранные с размером диаметра пор 0.45 мкм для фильтрования подвижной фазы
и проб.
Пипетки автоматические переменного объема дозирования вдиапазоне от 20 до 200 мм3с по
грешностью дозирования не более ± 1 %. в комплекте с подходящими наконечниками (микропипетки).
Микрошприц вместимостью 250 мкл.
Емкости для жидких проб (виалы) вместимостью 2 см3.
Вставки в виалы для микроколичеств вместимостью 300 мм3.
Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 19814, х.ч.
Натрий углекислый безводный, квалификации по ГОСТ 83. х.ч.
Калий фосфорнокислый однозамещвнный (дигидрофосфат)
(КН2РО4).
ч.д.а.
Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552 (98 %), ч.д.а.
" Сорбент марки Zorbax© Phenyl - апробирован и обеспечивают требуемую эффективность
хроматографического разделения. Данная информация не является рекламой указанного сорбента и не
исключаетвозможностьприменениядругихсорбентов,обеспечивающиханалогичноекачество
хроматографического разделения.
7