ГОСТ 31659—2012
Если масса пробы иная, чем 25 г, используют необходимое количество неселективной среды, исхо
дя из соотношения 1:10.
Для уменьшения объема работы, когда испытывают больше одной пробы от определенного про
дукта и когда очевидно, что объединенная навеска не влияет на результат испытания. — навески объе
диняют.
Пример — Если необходимо исследовать 10 навесок по 25 в, их объединяют и к 250 а добавляют
2,25 дм1неселективной среды.
8.1.2 Специфичность приготовления исходной суспензии для некоторых продуктов
Указанная специфичность приготовления может быть применена только для выявления бактерий
рода Salmonella.
8.1.2.1 Какао и какаосодержащие продукты (массовая доля какао более 20 %)
Добавляют в забуференную пептонную воду (см. 5.2.1) 50 г некислого казеина или 100 г/дм3 обез
жиренного молочного порошка и, если пищевые продукты предположительно содержат большое коли
чество грамположительных микроорганизмов, прибавляют после 2 ч инкубирования 0.018 г/дм3
бриллиантового зеленого (3.6 см3/дм3раствора, приготовленного по В.4.4). Казеин и молочный порошок
добавляют при приготовлении забуференной пептонной воды до стерилизации.
8.1.2.2 Кислые и кислотосодержащие пищевые продукты
При неселективном обогащении должна быть гарантия того, что pH не будет ниже 4.5.
pH кислых и кислотосодержащих продуктов стабилизируют путем использования забуференной
пептонной воды двойной концентрации.
Допускается также при высеве жидких высококислотных продуктов для предотвращения сни
жения pH сред на 0,5 и более pH продукта перед посевом доводить до (7,01 0.2).
При высеве твердых высококислотных продуктов доводят pH до (7.0 ±0,2) в посевах.
Доведение pH проводят с соблюдением правил асептики с помощью стерильных растворов
гидроокиси натрия и соляной кислоты, приготовленных по ГОСТ 10444.1. Количество добавляемых
растворов устанавливают опытным путем.
8.2Неселоктивное обогащение
Инкубируют исходную суспензию (см. 8.1.1) при температуре (37 ± 1) °С в течение (181 2) ч.
8.3 Селективное обогащение
Культуры, полученные после инкубирования по 8.2. пересевают в среды для селективного обога
щения. Для этого по 1см3культуры пересеваютв 10 см3 RVS-бульона и в 10см3селенитовой средыили
в 10 см3тетратионатного бульона Мюллер-Кауфмана.
Посевы на RVS-бульоне инкубируют при температуре (41.511.0) °С в течение (24 ± 3)ч (следят за
тем. чтобы температура не превышала 42,5 °С). а на тетратиоиатном бульоне и селенитовой среде по
севы инкубируют при температуре (37 11) °С в течение (24 13) ч.
Если из одного пищевого продукта проведен высев нескольких навесок (каждой отдельно) для вы
явления бактерий рода Salmonella, то допускается из каждого посева по 8.2 пересев проводить в один
флакон с каждой селективной питательной средой (RVS-бульоном. тетратионатным бульоном Мюл
лер-Кауфмана. селенитовой средой). При этом количество селективной среды во флаконе должно
быть увеличено по сравнению с 10 см3во столько раз. из скольких посевов проводят пересев.
Свежие продукты, не содержащие поврежденных микроорганизмов, подвергнутые каким-либо
воздействиям, например сушке, заморозке и другим, допускается высовать непосредственно в се
лективные среды, минуяэтапнесвлвктивного обогащения. Соотношениемежду количеством высе
ваемого продукта и средой должно быть не менее 1:10.
8.4 Пересев на чашки и идентификация
8.4.1 Культуры через 24 ч инкубирования на селективных средах пересевают по ГОСТ 26670 так.
чтобы получить хорошо изолированные колонии, на XLD-arap и на одну из агаризованных сред: вис
мут-сульфит агар, среду Плоскирева. среду Эндо, среду Левина или бриллиантовый зеленый агар.
При отсутствии большихчашекиспользуют для посева петлейдве средние чашки (одну за другой).
8.4.2 Чашки переворачивают (см. 8.4.1) вверх дном и помещают в термостат при температуре
(37 11) “С.
8.4.3 После инкубирования в течение (24
1
3) ч. а на бриллиантовом зеленом агаре — 48 ч. про
сматривают чашки (см. 8.4.2) и отмечают присутствие типичных колоний бактерий рода Salmonella и не
5