ГОСТ 31659—2012
0.5 см3стерильной дистиллированной воды. К полученной суспензии добавляют один ONPG-диск и по
мещают в водяную баню при температуре (37±1)°С. Желтое окрашивание, появившееся через
15—20 мин, указывает на положительную реакцию. Для окончательного учета отрицательного результа та
посевы продолжают инкубировать в течение 2. 4 и 24 ч.
8.5.3.6 Определение образования ацетоина (реакция Фогес—Проскауера) (5.2.14)
Суспендируют петлей испытуемую культуру в стерильной пробирке, содержащей 3 см3VP среды
или мясо-пелтонного бульона с глюкозой.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24
1
3) ч.
После инкубации прибавляют две капли раствора креатина, три капли спиртового раствора 1-на
фтола и две капли раствора гидроокиси калия, перемешивают содержимое пробирки после прибавле
ния каждого реактива.
Появление через 15 мин от розового до светло-красного окрашивания указывает на положитель
ную реакцию.
Бактерии рода Salmonella не образуют ацетоина (реакция Фогес-Проскауера отрицательная).
Допускается определение ацетоина проводить без применения раствора креатина. Для
утого после инкубирования к 1см3 отобранной культуральной жидкости прибавляют 0.6 см3рас
твора 1-нафтола и 0.2 см3раствора гидроокиси калия. После прибавления каждого реактива про
бирку встряхивают. Появление розового окрашивания через 15мин указывает на положительную
реакцию.
8.5.3.7 Определение образования индола (см. 5.2.15)
Культуры пересевают в пробирку, содержащую 5 см3триптон/трмптофановой среды, или в бульон
Хоттингера. или в мясо-пептонный бульон с L-триптофаном. Посевы инкубируют при температуре (37
1
1) °С в течение (24 1 3) ч.
После инкубирования к посевам прибавляют по каплям 1см3 реактива Эрлиха или Ковача, содер
жимое пробирки перемешивают.
Образование красного кольца указывает на положительную реакцию. Желто-коричневое кольцо
указывает на отрицательную реакцию.
Бактерии рода Salmonella не образуют индол.
8.5.3.8 Определение ферментации маннита и сахарозы
Культуры пересевают в среды Гисса с маннитом или сахарозой. Посевы инкубируют при тем
пературе (37 * 1) “С в течение (24 ± 3) ч.
Бактериирода Salmonella но ферментируют сахарозу, но ферментируют маннит. При сбражи
вании маннита цвет среды изменяется, образуется или не образуется газ.
8.5.3.9 Определение подвижности
Культуры пересевают уколом в полужидкий питательный агар или полужидкий мясо-пвптон-
ный агар.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 3) ч.
При росте подвижных культур отмечается диффузионный рост по всему столбику агара, при
росте неподвижных культур — вокруг места укола.
Бактерии рода Salmonella подвижны, кроме S. gallinarum и S. pullorum.
8.5.3.10 Интерпретация биохимических тестов приведена в таблице А.1 (приложение А).
8.5.4 Серологическая идентификация
8.5.4.1 Общие положения
Определение присутствия соматического О-антигена, антигена вирулентности Vi-, жгутикового
Н-антигена в изолированных колониях (см. 8.5.2) проводят с помощью реакции агглютинации на пред
метном стекле с соответствующими сыворотками после исключения самоагглютинирующих штаммов.
Сыворотки используют в соответствии с инструкцией изготовителя, если есть отличие от описания, при
веденного ниже.
Серологическую идентификацию для подтверждения принадлежности к бактериям рода
Salmonella проводят с культурами, предварительно пересеянными на поверхность мясо-пептонногоага
ра или ГРМ-агара.
8.5.4.2 Исключение самоагглютинирующих штаммов
Помещают каплюфизиологического раствора на тщательноочищенное предметноестекло. Диспер
гируют в этой капле часть тестируемой колонии так, чтобы получилась гомогенная и густая суспензия.
8