ГОСТ 31659—2012
- лактоза — 10,0 г.
- сахароза — 10,0 г;
- глюкоза — 1.0 г;
- железо (III) цитрат — 0.3 г;
- тиосульфат натрия — 0.3 г;
- феноловый красный — 0.024 г (или 6 см3 раствора, приготовленного по В.5.2, если среда состоит из от
дельных компонентов);
- агар — от 9 до 18 г;
- вода — 1000 см3
В.11.2 Приготовление
При нагревании растворяют компоненты или дегидратированную основу среды в воде. Устанавливают такой
pH. чтобы после стерилизации он составлял (7.4 ±0.2) при температуре 25 ‘С. Переносят среду в пробирки по
7—8 см3. Стерилизуют 15 мин в автоклаве при (121 ± 1) *С. Затем пробирки оставляют в наклонном положении так.
чтобы высота столбика среды составляла около 2.5 см. а скошенная поверхность над ним — 5 см.
Допускается использование агара Клиглера или среды Олькеницкого. Среды готовят по инструкциям,
указанным на этикетках.
В.12 Агар с мочевиной (агар Кристенсена)
В.12.1 Основа среды
В.12.1.1 Состав:
- пептон — 1.0 г;
- глюкоза — 1.0 г;
- хлористый натрий (NaCI) — 5.0 г;
- однозамещенный фосфорнокислый калий (КНаРО<) — 2.0 г;
- феноловый красный — 0,012 г (или 3 см3 раствора, приготовленного по В.5.2. если среда состоит из от
дельных компонентов);
- агар — от 9 до 18 г;
- вода — 1000 см3.
В.12.1.2 Приготовление
При нагревании растворяют компоненты или дегидратированную основу среды в воде. Устанавливают та
кой pH. чтобы после стерилизации он составлял (6.8 ± 0.2) при температуре 25 °С. Основу среды в определенных
объемах разливают в колбы или флаконы и стерилизуют в автоклаве при температуре (121 = 1 )аС в течение
15 мин.
В.12.2 Раствор мочевины
В.12.2.1 Состав:
- мочевина — 40 г;
- вода до конечного объема — 100 см3.
В.12.2.2 Приготовление
Мочевину помещают в колбу вместимостью 100 см3, растворяют а воде, объем раствора доводят водой до
метки. Раствор мочевины стерилизуют фильтрацией по ГОСТ 26670 через фильтры с размером пор 0.22 мкм или
текучим паром в течение 30 мин.
В.12.3 Раствор фенолового красного
В.12.3.1 Состав и приготовление — по В.5.2.
В.12.4 Готовая среда
В.12.4.1 Состав:
- основа (см. В.12.1)— 950 см1;
- раствор мочевины (см. В.12.2) — 50 см3.
В.12.4.2 Приготовление
Прибавляют с соблюдением правил асептики раствор мочевины к основе, предварительно расплавленной и
охлажденной до температуры от 44 аС до 47 ‘С. Разливают готовую среду в стерильные пробирки 7—8 см3. После
стерилизации среду скашивают по В.11.2.
ВИЗ L — лизиндекарбоксилазная среда
В.13.1 Состав:
- L-лизин моногидрохлорид — 5.0 г.
- дрожжевой экстракт — 3.0 г;
- глюкоза — 1.0 г;
- бромкрезоловый пурпуровый — 0.015 г (или 5 см3раствора, приготовленного по В.13.3);
- вода — 1000 см3.
В.13.2 Приготовление
Компоненты растворяют в воде при нагревании.
Устанавливают pH так. чтобы после стерилизации он составлял (6.8 ±0.2) при температуре 25 *С.
Переносят среду в пробирки по 2—5 см1.
Стерилизуют 15 мин в автоклаве при температуре (121 г 1) ‘С.
17