ГОСТ 31659—2012
В.4.4.2 Приготовление
Бриллиантовый зеленый переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллиро
ванной воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят дистиллированной во
дой до метки. Раствор хранят в закрытом сосуде из темного стекла при комнатной температуре не более 3
мес.
В.4.5 Раствор 4
8.4.5.1 Состав:
- сухая бычья желчь — Ю г
- вода — до 100
cm
j.
В.4.5.2 Приготовление
Сухую желчь растворяют в 100 см3 дистиллированной воды или используют 100 си3натуральной желчи.
Раствор желчи или натуральную желчь стерилизуюл при температуре <121 а 1) ‘С в течение 20 мин. Раствор
хранят не более 1 мес при температуре (3 ± 2) "С.
8.4.6 Готовая среда
В 4.6.1 Состав:
- основа среды по В. 4.1— 100 см3:
- раствор 1— 10 см3;
- раствор 2—2 см3.
• раствор 3—0.2 см3.
- раствор 4—5 см3.
8.4.6.2 Приготовление
Указанные растворы прибавляют к основе среды в приведенном выше порядке, перемешивая смесь после
каждого прибавления, среду разливают по 10 си3 в пробирки.
Среду используют в день приготовления.
Для повышения селективности среды допускается добавлять к среде раствор новобиоцина натриевой соли
из расчета 0.5 см* раствора новобиоцина натриевой соли на 100 см3основы среды.
В.4.7 Раствор новобиоцина
В.4.7.1 Состав.
- новобиоцин натриевая соль — 0.04 г;
- вода — 5 см3.
В.4.7.2 Приготовление
Новобиоцин натриевую соль растворяют в дистиллированной воде. Раствор стерилизуют фильтрацией по
ГОСТ 26670 через мембранный фильтр размером пор 0,22 мкм. хранят при температуре <3 ± 2) °С в течение четы
рех недель.
В.5 Ксилоза-лизин-деоксихолатиый агар (XLD-arap)
В.5.1 Основа среды
В.5.1.1 Состав:
- дрожжевой экстракт (порошок) — 3.0 г:
- хлористый натрий (NaCl) — 5.0 г:
- ксилоза — 3,75 г;
- лактоза — 7.5 г;
- сахароза — 7.5 г;
- 1-лизин гидрохлорид — 5.0 п
- тиосульфат натрия — 6.8 г;
- железо III аммоний цитрат — 0.8 п
- феноловый красный — 0.08 г (или 20 см3 раствора, приготовленного по 5.2. если среда состоит из отдель
ных компонентов).
- деоксихолат натрия — 1.0 г;
- агар — от 9 до 18 г*;
- вода — 1000 см1.
В.5.1.2 Приготовление
При нагревании растворяют дегидратированные компоненты основы или дегидратированную основу в воде
при частом помешивании. Доводят до кипения, но не кипятят, избегая перегрева.
Устанавливают pH так. чтобы после прогрева он составлял (7.4 ± 0.2) при температуре 2S "С. Разливают осно
ву в пробирки или флаконы подходящей вместимости. Затем прогревают на кипящей водяной бане около 5 мин.
В.5.2 Раствор фенолового красного
В.5.2.1 Состав.
- феноловый красный — 0.4 г;
- вода — 100 см1.
* Зависит от желирующих свойств.
15