ГОСТ 31483—2012
Т а б л и ц а 5 — Условия анализа градуировочного раствора методом МЭКХ
Определяемые витамины а порядке выхода
Нихотимамид (В4>, лиридоксии (Ве>, рибофлавин (Bj).
аскорбиновая кислота (С), пантотеноеая кислота <Ва).
никотиновая кислота (В4>. фолиевая кислота (Вс). тиамин (В,)
Ввод градуировочного раствора (пробы)
30 мбар. 20 С
Условия анализа
Длина волны, нм
200 (в начале анализа). 240 (после пика пантотеновой
хислоты)
Напряжение. кВ
+23
Давление, мбар
В начале анализа — 0. после появления пика пантоте
новой кислоты (В3) прикладывают давление 50 до кон
ца анализа
Температура. *С
40
Время, мин
17—20
Ведущий электролит
N?
2
(см.
6
.
2
.
1
.
10
)
При выполнении анализа необходимо изменение условий регистрации злектрофореграммы. а
именно приложениедавления и изменение рабочей длины волны после появления пика пантотеновой
кислоты.
Для определения момента времени, по истечении которого необходимо приложить давление ииз
менить длину волны, готовят пробный раствор витаминов всоответствии с 6.2.3.5 и регистрируют проб
ную электрофореграмму при длине волны 200 нм. В этом случае после регистрации пантотеновой
кислоты (пятого компонента анализируемого раствора) в ручном режиме задают давление 50 мбар и
ведут анализдо появления пика последнего компонента (тиаминхлорида)пробы. Не останавливая ана
лиз, необходимо нажать клавишу «5» на клавиатуре прибора и внести новые условия, перелистывая
появляющиеся окна клавишей «ENT». В ручном режиме длина волны без остановки анализа не может
быть установлена, поэтому заканчивают пробную электрофореграмму при измерении на длине волны
200 нм. Пробную электрофореграммуне используют для построенияградуировочнойзависимости. Опе
рацию нахождения времени включения давления и изменения длины волны регистрации, описанную
выше, можно выполнить один раз и использовать полученный параметр до тех пор. пока время выхода
пантотеновой кислоты будет меньше задаваемого.
Установленный промежуток времени вносят в программу поэтапного анализа системы
«Капель-105» вместо с изменением длины волны регистрации (пример составления программы пред
ставлен вприложении А. таблица А.З) и используют ее для записи электрофореграмм градуировочных
растворов и анализа растворов, полученных из испытуемых проб.
Для проведения градуировки системы последовательно, не менее трех разготовят исразуже ана
лизируют градуировочные растворы (см. 6.2.3.5). На полученных электрофореграммах проверяют пра
вильность автоматической разметки пиков, при необходимости корректируют разметку, удаляют
лишние пики идалее обрабатывают злектрофореграммы согласно процедуреградуировки, описанной в
руководстве пользователя программы «МультиХром». В таблице компонентов должно быть столько
строк, сколько витаминов анализируют. Втаблице концентраций создаютстолькоградуировочных уров
ней. сколько получено электрофореграмм. при этом концентрации компонентов в каждом уровне будут
одинаковые.
Послевыполнения процедуры градуировки программа автоматически рассчитывает градуировоч
ный коэффициент и СКО имеющейся выборки. Градуировку следует считать успешной, если величина
СКО не превышает 5 % для никотинамида (В5), пиридоксина (В6), пантотеновой (В3), никотиновой (В5),
фолиевой (Вс) кислот и 10 % — в случае рибофлавина (В2), аскорбиновой кислоты (С) и тиамина (В,).
а также если отклонения времени выхода пиков компонентов не превышают 5 %
среднеарифметических значений. Если градуировка признается неудовлетворительной, продолжают
готовить ианализировать градуировочные растворы, создавая дополнительные градуировочные
уровни до тех пор, пока указан ные условия не будут выполнены. При этом допускается
отбраковывать неудовлетворительные дан ные, однако число принятых к градуировке точекдолжно
быть не меньше трех.
9