ГОСТ 31483—2012
Т а б л и ц а 4 — Условия анализа градуировочного раствора методом КЗЭ
Определяемые витамины в порядке выхода
Тиамин (В(). рибофлавин (Bj), пиридоксии (В^). аскорбиновая
кислота (С), пзитотеноеая кислота (В.^), никотиновая кислота <BS),
фолиевая кислота (Вс)
Ввод градуировочного раствора (пробы)
30 мбар. 20 с
Условия анализа
Длина волны, нм
200
Напряжение,кВ
♦25
Давление, мбар
8
начале анализа —
0
мбар, после появления пика пиридок
сина прикладывают давление 30 мбар до конца анализа
Температура, аС
30
Время, мин
16— 18
Ведущий электролит
№
1
(см.
6
.
2
.1.9)
При выполнении анализа необходимо изменение условий регистрации электрофореграммы. а
именно приложения давления после появления пика пиридоксина.
Для определения момента времени,поистечении которого необходимо приложитьдавление, гото
вятпробный раствор витаминов всоответствии с6.2.3.5 иснимают пробную электрофореграмму. Вэтом
случае после регистрации пиридоксина (3-го компонента анализируемого раствора) в ручном режиме
задаютдавление 30 мбар иведут анализдо появления пика последнего компонента (фолиевой кислоты)
пробы. Для этого без остановки анализа необходимонажать клавишу «5» наклавиатуреприбора ивнес
ти новые условия, перелистывая появляющиеся окна клавишей «ENT». Пробную электрофореграмму
не используют для построения градуировочной зависимости. Операцию нахождения времени включе
ния давления,описаннуювыше, можновыполнитьодин раз ииспользовать полученный параметрдо тех
пор. пока время выхода пиридоксина будет меньше задаваемого.
Установленный промежуток времени вносят в программу поэтапного анализа системы капилляр
ного электрофореза «Капель-105» (пример составления программы представлен в приложении А, таб
лица А.2) и используют ее для записи электрофореграммы градуировочного раствора и
анализа растворов, полученных из испытуемых проб.
Для проведения градуировки системы последовательно, не менее трехраз готовятисразуже ана
лизируют градуировочный раствор (см. 6.2.3.5). На полученных электрофореграммах проверяют пра
вильность автоматической разметки пиков, при необходимости корректируют разметку, удаляют
лишние пикиидалееобрабатывают электрофореграммы согласно процедуреградуировки, описанной в
руководстве пользователя программы «МультиХром». В таблице компонентов должно быть столько
строк, сколько витаминованализируют. Втаблице концентраций создают столько градуировочных уров
ней. сколько получено электрофореграмм. при этом концентрации компонентов в каждом уровне будут
одинаковые.
После выполнения процедуры градуировки программа автоматически рассчитывает градуировоч
ный коэффициент исреднеквадратичное отклонение (СКО) имеющейся выборки. Градуировку следует
считать успешной, если величина СКО не превышает 5 %для тиамина (В,). пиридоксина (В6),пантотено-
вой (В3), никотиновой (В5), фолиевой (Вс) кислот и 10 % — в случае рибофлавина (В2) и аскорбиновой
кислоты (С), а также если отклонения времени выхода пиков компонентов не превышают 5 % среднеа
рифметических значений. Если градуировку признают неудовлетворительной, продолжают готовить и
анализировать градуировочный раствор, создавая дополнительные градуировочные уровни до тех пор,
пока указанныеусловиянебудут выполнены. При этомдопускается отбраковывать неудовлетворитель
ныеданные, однако число принятыхкградуировке точекдолжно быть не меньше трех.
6.2.4.2 Градуировка системы методом мицеллярной электрокинетической хроматографии
Рекомендуемыепараметры вводаиусловия анализа представлены втаблице 5. Непосредственно
перед анализом растворы центрифугируют втечение 5 мин при 5000—6000 об/мин.
8