ГОСТ ISO 11133-2—2011
5.2.1.3 Условия инкубации
Инокулированмые культуральные среды инкубируют с соблюдением условий, описанных в соответ
ствующем стандарте и приведенных всоответствующих таблицах приложения В.
5.3Методы, применяемые в отношении твердых культуральных сред
5.3.1 Количественный метод
5.3.1.1 Общие положения
Это обычный метод, пригодныйдля большинства плотных культуральных сред. Он может быть непри
годным для испытаний некоторых видов плесневых грибов.
5.3.1.2 Процедура
Используют рабочие культуры в соответствии с 5.2.1.
Отбирают соответствующее число чашек, которое является представительными для каждой партии,
подлежащей испытаниям, и обеспечивают правильное высушивание поверхности каждой чашки. Чашки с
эталонной средой готовят аналогичным образом.
По поверхности испытуемых и эталонныхчашек распределяют инокулят разбавленной рабочей куль
туры с целью внесения количества, которое входит в рекомендуемые пределы, приведенные в 5.2.1.
П р и м е ч а н и я — Может также использоваться чашечный метод для культуральных сред, обычно
применяемых для подсчета таким образом.
Чашки инкубируют в соответствующих условиях, как это установлено в соответствующих стан
дартах.
Проводят подсчет колоний, присутствующих в каждой чашке или в каждой капле, по обстоятель
ствам. Оценивают размер и внешний вид колоний.
5.3.1.3 Расчеты
Исходя из объема, распределенного на чашках, и фактора разбавления можно рассчитать среднее
количество микроорганизмов в среде. В случае использования капельных методов необходимо принимать
во внимание количество капель и их объем.
5.3.1.4 Интерпретация результатов
Для интерпретации результатовследует рассчитать коэффициент производительности
PR
(см. 5.2.3.2)
или фактор селективности Sf (см. 5.2.3.3).
5.3.2 Полуколичественный метод посева штрихом, основанный на экометрии
5.3.2.1 Общие положения
Метод посева штрихом пригоден для определения рабочих характеристик плотных и жидких культу
ральных сред, данный метод является только лолуколичественным. Таким образом, показатели роста явля
ются лишь ориентировочными, ион может рассматриваться только какдополнительное испытание твердых
культуральных сред.
При использовании данного метода испытуемые культуральные среды необходимо высушитьдо од
ной и той же степени, и вся процедура должна быть стандартизирована, чтобы можно было сравнивать
результаты, полученныедля различных партий.
5.3.2.2 Процедура
Чашки с агаром готовят обычным способом, используя около 15 см3агара. Среды, обычно использу
емые вчашечном методе, например агар для чашечного подсчета, могут также подвергаться испытаниям
поверхностным культивированием на затвердевших сродах.
Используют рабочие культуры, как это описано в 5.2.1.
В чашки делают посев штрихом, как это показано на рисунке 1, используя петлю на 1мкл. Проводят
четыре параллельные линии петлей с интервалом приблизительно 0,5 см в сектореА. Штриховую разводку
повторяют для секторов В и С и завершают в секторе D одной линией. Для помощи в выполнении точного
посева штрихом под чашкой можно использовать шаблон.
Соблюдают время и температуру инкубации, установленные в стандартных методах.
П р и м е ч а н и е — В культуру необходимо погружать только петлю, но не проволоку. Петля должна
быть полностью заполнена культурой. Избыточную жидкость удаляют трехкратным нажатием на расширен
нуючасть петли, используя край емкости. При посеве штрихом угол между петлей и поверхностью агара должен
быть от 20" до 30". Давление петли на поверхность агара и скорость посева штрихом должны быть всегда
соразмерны. Следует избегать погружения петли в культуру, если на поверхности бульона имеются пена и/или
пузыри.
Обычно для посева штрихом всех секторов отА до D используют одну и туже петлю безобработки в
пламени между операциями посева штрихом. В некоторых случаях, когда более низкий показатель роста
5