ГОСТ IS 011133-2—2011
2) вдругих случаях, когда достигается фиксированное минимальное количество целевых микроорга
низмов и максимальное количество нецелевых микроорганизмов, более уместно, что:
- содержание целевых микроорганизмов должно достигать от 106КОЕ/см3до 10* КОЕ/см3;
- содержание нецелевых микроорганизмов не должно превышать 104КОЕ/ см3 в селективном
бульоне;
3) в случае разбавителей и транспортных сред не требуется ни пониженное, ни повышенное количе
ство целевых и/или нецелевых микроорганизмов. Число микроорганизмов после инкубации вданных сре
дах должно быть в пределах ± 50 % исходного количества.
Примечание — Качество жидкой среды в плане свойств оптимального роста проявляется наиболее
обстоятельно на ранней стадии роста. Анализ продолжительности лог-фазы и роста в начале лог-фазы дает
наиболее точную информацию относительно производительности и селективности целевых и нецелевых
микроорганизмов соответственно в испытуемом и эталонном бульонах. Таким образом, если пытаются
обнаружить только минимальные различия в качестве сред, следует провести посев штрихом из жидких сред в
чашках после сокращенного периода инкубации продолжительностью, например. 6 или 12 ч.
5.4.3 Полуколичественный метод с одной пробиркой для целевых, нецелевых и смешанных
микроорганизмов
5.4.3.1 Процедура
Отбирают нужное количество пробирок или порций по 10 мл каждой испытуемой партии.
Инокуляция целевых и нецелевых микроорганизмов каксмешанной культуры: инокулируют одну про
бирку испытуемого бульона примерно от 10 до 100 КОЕ целевых микроорганизмов и в ту же пробирку
инокулируют повышенное число нецелевых микроорганизмов {> 1000 КОЕ на каждую пробирку), и переме
шивают.
Инокуляция нецелевых микроорганизмов: инокулируют одну пробирку испытуемого бульона микро
организмами с повышенным содержанием (> 1000 КОЕ) и перемешивают.
Соблюдают время и температуру инкубации, установленные в стандартных методах.
Отбирают 10 мкл смешанной культуры и проводят посев штрихом вчашке с конкретной селективной
средой для целевых микроорганизмов.
Отбирают одну петлю (10 мкл) культуры нецелевых микроорганизмов и проводят посев штрихом в
чашке с неселективной средой (например, стриптиказо-соевым агаром).
Инкубируют обе чашки в надлежащих условиях необходимое время, как это установлено в соответ
ствующих стандартах.
5.4.3.2 Расчеты и интерпретация результатов
Производительность испытуемогожидкого бульона является удовлетворительной, если по меньшей
мере 10 колоний целевых микроорганизмов выросли в чашке с селективным агаром.
Селективность испытуемого жидкого бульона является удовлетворительной, если не наблюдалось
никакого роста (или менее 10 КОЕ) нецелевых микроорганизмов в чашке с неселективным агаром.
5.4.4 Качественный метод с одной пробиркой
5.4.4.1 Общие положения
Данный метод пригоден для определения рабочих концентраций жидких культуральных сред. Метод
является только качественным, и оценки, таким образом, приблизительные. Для испытания мутных сред,
например тетратионатный бульон, этот метод неприменим.
5.4.4.2 Процедура
Для эксплуатационных испытаний жидких культуральных сред рабочие культуры непосредственно
инокулируют в испытуемую среду, используя петлю на 1мкл.
Соблюдают время и температуру инкубации, установленные в стандартных методах.
5.4.4.3 Интерпретация результатов
Качественное определение следует проводить визуально путем определения баллов роста, напри
мер от 0 до 2.
Для пробироки бутылок
- 0 соответствует нулевой мутности;
-1 соответствует очень слабой мутности;
- 2 соответствует удовлетворительной мутности.
8