ГОСТ Р 53773—2010
5.2.8 Колбы мерные вместимостью 25,100 см3с одной отметкой поГОСТ 1770.
5.2.9 Емкостидля жидких проб (виалы) вместимостью 2—6 см3.
5.2.10 Центрифугалабораторная с фактором разделения (д-фактор) 800—1000.
5.2.11 Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336:
воронкилабораторные,
стаканы вместимостью 50.100 и 1000 см3.
5.2.12 Вода дистиллированная по ГОСТ6709.
5.2.13 Спиртэтиловый ректификованный по ГОСТ Р 51652.
5.2.14 Ацетонитрил для ВЭЖХ по [1].
5.2.15 Кислотаортофосфорная по ГОСТ 6552.
Допускается применениедругихсредствизмерений, вспомогательногооборудования, неуступаю
щих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необхо
димую точность измерения, а также реактивов иматериалов по качествуне хуже вышеуказанных.
5.3 Подготовка к проведению определения
5.3.1 Подготовка проб для хроматографического определения
Для качественногоопределения антоцианинов в концентрированныхсоках ипюре взвешивают 1г
пробы с записью результата до третьего знака после запятой и пробу разбавляют в 5 см3дистиллиро
ваннойводы (пюре исоковуюпродукциюсвысоким содержаниемрастворимыхсухихвеществразбавля
ют дистиллированной водой в соотношении от 1:2 до 1:5). Подготовленную пробу для удаления мутной
взвеси центрифугируют ифильтруют через мембранный фильтр сдиаметром пор 0,2 мкм.
Для качественного определения антоцианинов вдругой соковой продукции, а также всоках прямо
го отжима 1 гпробы без предварительного разбавления центрифугируют и фильтруютчерез мембран
ный фильтр сдиаметром пор0,45 мкм.
При суммарном содержании антоцианинов в соке менее 0.1 % пробу фильтруют через мембран
ный фильтр, не разбавляя.
5.3.2 Приготовление подвижной фазы для жидкостной хроматографии
Готовят раствор ортофосфорной кислоты с pH = 2,1. Для этого в дистиллированную воду по кап
лям добавляют концентрированную ортофосфорную кислоту (см. 5.2.15), pH контролируют с помощью
pH-метра. Полученный раствор ортофосфорной кислоты смешивают с ацетонитрилом в соотноше
нии 88:12 в процентах пообъему. Подвижную фазуфильтруют подвакуумом через мембранный фильтр с
диаметром пор 0.45 мкм.
Срокхранения подвижной фазы — одна неделя при хранении в плотно укупоренной посуде.
5.3.3 Выполнение измерений
Условияхроматографическогоанализа:
колонкааналитическаядлиной 250 мми внутреннимдиаметром4.6 мм, заполненнаяоктадецилси-
ликагелем размером частиц 5 мкм:
температура колонки: 35 X :
детектирование: фотометрический детектор с длиной волны 518 нм:
скорость подачи элюента: 1,0см3/мин;
объем вводимой пробы: 10—20 мкл.
Градиентноеэлюирование:
ортофосфорная кислота с pH = 2.1 (см. 5.3.2) в соотношении с ацетонитрилом (см. 5.2.14) в соот
ветствии с таблицей 1.
Т а б л и ц а 1 — Состав подвижной фазы
Длительность,
УИН
Ортофосфорная кислота.
% по объему
Ацетонитрил,
% по объему
Тип градиента
0
20
30
8 8
75
60
12
25
40
Л
инейный
Л
инейный
Л
инейный
Хроматографическая система (обращенно-фазовая колонка в качестве неподвижной фазы и гра
диент водного раствора ортофосфорной кислоты и ацетонитрила) должна обеспечивать разделение
основных пиков антоцианинов. приведенных втаблице Б.1 приложения Б.
3