С. 18 ГОСТ 25755-91
В растворенном состоянии биологические компоненты набора
храня? при температуре 4~6°С и течение 1 мсс. Перед каждым
новым исследованием осадок латекса необходимо ресуспенднро-
в;:ть с помощью шприца.
2.8.2.3. /7 р иго то в л е н и ерабочейс у с п е н з и ил а
те к с н ог о конъюгата
Суспензию латексного конъюгата смешивают с рабочим буфер
ным раствором в соотношении 1:50 и тщательно перемешивают,
стараясь избежать вспенивания раствора. Рассчитывают количест
во рабочегобуферногораствора, необходимое для постановки
РЛЛ При этом учитывают количество исследуемых проб сыворо
ток и объема, а котором проводится титрование образцов. Рабо
чую суспензию латексногоконъюгатаиспользуют втечение
15 мни с момента приготовления.
2.6.3. Проведение исследования
Исследуемые и контрольные сыворотки предварительно разво
дят 1:20 физиологическим раствором (pH 7,2—7,4).
Во все лунки планшетов для иммунологических реакций вно
ся I по 0,05 си} рабочего буферного раствора. В первые 10 лунок
горизонтального ряда (ряд А) вносят но 0,05 см3 предварительно
разведенных исследуемых сывороток, а в И*ю и 12-ю лунки —
аналогичный объем контрольных (положительную и отрицатель
ную сыворотки — компоненты № 2 и St 3). Содержимое всех ря
дов титруют методом двукратных разведений в объеме 0,05 см3,
получая разведения сывороток от 1:40 до 1:5120. Из последних
лунок каждого ряда удаляют-0,05 см* содержимого. Титрование
сывороток осуществляетсямногоканальной пипеткой или с по
мощью микротитраторов, согласно прилагаемым к ним инструк
циям. Допускается проводить титрование сывороток в объемах
0.025 к 0,1 см’ при наличии соответствующего оборудования.
Во все лунки планшетов вносят рабочую суспензию латексного
конъюгата, приготовленную, как указано в и. З.Ь.2.3, в объеме,
равном объему, п которомпроводили титрование сывороток.
Планшет накрывают крышкой, аккуратно встряхивают и остав
ляют на столе при комнатной температуре.
2.8.4. Оценка результатов
Результаты учитывают через 12—16 ч после постановки реак
ции. Образование на сферической поверхности лна лунок диффуз
ного осадка с виде «зонтика», как и в лунках 11-го вертикального
ряда планшета (положительный контроль), свидетельствуют о по
ложительном результате исследования, характеризующем наличие
специфических антител в исследуемых сыворотках.
Образование из дне лунок в центреосадка в виде «точки»,
как и в лунке 12-го вертикального ряда планшета (отрицательный
контроль), свидетельствует об отрицательном результате исследо-