ГОСТ 25755-91 С.
9
орссцирующих антител вируса инфекционного ркнотрахеита в
мазках-отпечатках и гистологических срезах, приготовленных из
легких, трахеи, почек, гортани и лимфатических узлов.
2.4.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Микроскоп люминесцентный.
Термостат обеспечивающий регулирование температуры 37 °С.
Микротом с замораживающим столиком.
Стекла предметные по ГОСТ 9284.
Стекла покровные по ГОСТ 6672.
Чашки Петри,
Пипетки пастеровские.
Ацетон по ГОСТ 2603.
Натрий хлористый по ГОСТ 4233.
Натрий фосфорнокислый двузамещенный по ГОСТ 4172.
Натрий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 245.
Масло нефлуоресцируюшее.
Иммуноглобулиныфлуоресцирующие (конъюгат) против ви
руса инфекционного ринотрахеита.
Конъюгат нормальною глобулина.
2.4.2 Подготовка к исследованию
Для обнаружения возбудителя из патологического материала
готовят мазки-отпечатки или среды на замораживающем микро
томе толщиной 3—5 мм. Препараты подсушивают на воздухе, фик
сируют в ацетоне 10 мин при комнатной температуре и отмывают
в проточной водопроводной воде 5—10 мни.
Препараты подсушивают и наносит флуоресцирующие имму
ноглобулины в рабочем разведении.
Обработкуведутно влажной камере при 37°С в течение
40 мин. Затем препараты ополаскивают в физиологическом раст
воре (pH 7.2—7,4), три раза меняя раствор, в дистиллированной
воде и подсушивают па воздухе. На препарат наносят нефлуорсс-
цирующее масло.
Для контроля часть мазков-отпечатков или срезов аналогично
обрабатывают конъюгатом нормального глобулина.
2.4.3. Проведение исследования
Мазки-отпечатки или срезы просматривают под люминесцент
ным микроскопом в сине-фиолетовых лучах.
2.4.4. Обработка результатов
Наличие яркого желто-зеленого цветадиффузного свечения
цитоплазмы клеток свидетельствует об обнаружении возбудителя
болезни. В контрольных препаратах наблюдают тусклое зелено
вато-серое свечение ткани.
2.5. Ме т о др е а к ц и ин е й т р а л и з а ц и и(PH)
Сущность метода заключается в подавлении цитопатнческого
действия вируса в культуре клеток нейтрализующими антителами
сыворотки крови.