ГОСТ 25735—91 С. 17
обследовании животных, ранее не вакцинированных против ИРТ,
свидетельствует о циркуляции в стаде возбудителя болезни н слу
жит основанием для произведения дополнительных исследований
по уточнению диагноза.
Сыворотки, давшие сомнительную реакцию, подлежат повтор
ному исследованию и при подтверждении первоначального резуль
тата считаются положительными.
2.8.Ме т о лр е а к ц и ил а т с к с а г г л ю т и н а ц и н (РЛА)
Сущность метода заключается в специфическом взаимодейст
вии антител исследуемой сыворотки с антигеном, иммобилизован
ным на поверхности латексных частиц, приводящем к агглютина
ции последних.
2.8.1. Аппаратура, материалы и реактивы
96-луночные полистироловые микропаиели (планшеты) для им
мунологических реакций с U-образным дном.
Дозируюшие одноканальные или многоканальные пипетки объ
емом 0,05—0,25 см3.
Капельницы и пипетки микрогитраторов типа«Такачи» или
«Титертек» для титрования в объемах 0,025; 0,05 и 0.1 см3.
Стеклянные градуированные пипетки по ГОСТ 25336 вмести
мостью 1,0; 5.0; 10,0 см3.
Шприц медицинский объемом 5 см3 с иглами.
Диагностический набор,’ содержащий следующие компоненты:
Х? 1 — конъюгат латекса со специфическим антигеном;
Хг 2 — специфическую положительную сыворотку;
X? 3 — отрицательную сыворотку;
№ 4 —бычий сывороточный альбумин;
№ 5 — 10 кратный концентрат рабочего буферного раствора.
2.8.2. Подготовка к исследованию
2.8.2.1. П р и г о т о в л е н и ер а б о ч е г об уферног о ра
створа
Рабочий буферный раствор (0.2 М глицерин-гидроокись натрия
с 0,15 М №С1, pH 8.5 -8,7) предназначен для титрования сыворо
ток и постановки реакции. Для его приготовления компонент Хв 5
растворяют в 180 см3 дистиллированной воды, фильтруют, прове
ряют pH. При необходимости доводят f)H до 8,5—8,7 растворами
гидроокиси натрия или соляной кислоты с массовой концентраци ей
I моль/дм*. Компонент4 растворяют в полученном буфер
ном растворе. Рабочий буферный раствор хранят при температуре
4—6°С в течение 1 мес.
2.3.2.2. П о д г о т о в к а б и о л о г и ч е с к и х компонентов
набора
Латексный конъюгат (компонент М I) тщательно суспендиру
ют в 2 см* дистиллированной воды, используя шприц с иглой.
Компоненты X? 2 и Х> 3 растворяют в 1 см* дистиллированной
волы.