ГОСТ 25755—91 С 15
ее 3 мое.
Содержимое каждой ампулы (флакона) со специфическим ан
тигеном растворяют в 20 см3 адсорбционного буферного раствора.
Содержимое ампул с антивидовым нммуноферментным конъюга
том и инертным белком растворяют в 20 см3 инкубационного бу
ферного раствора.Положительную н отрицательную сыворотки
растворяют в 5 см3 инкубационного буферного раствора, получая
разведения 1:100.
Растворенныеантигенысыворотки, антнвидовойконъюгат
хранят при 4—6°С 3—4 недели, раствор белка — в течение 2—
3 мос при минус 20“С.
2.7.3. Проведение исследования
21.2Л. С о р б ц и яа н ти г е н анам ик р о п а н е л и
В лунки микропанелей вносят по 0,1 см3 рабочего раствора
специфического антигена, приготовленного, как указано в п. 21.2.2,
закрывают крышкой и выдерживают при 4 X в течение 16—18 м.
Микроланели промывают инкубационным буферным раствором
три раза по 5 мин путем заполнения лунок и удаления раствора
сливанием или отсасыванием с помощью вакуумного насоса или
специального промывающего устройства.Порцию промывочного
раствора используют однократно.
Неиспользованные микропанели с адсорбированным антигеном
высушивают при комнатной температуре и хранят при 4—6 Х не
бол
Во осе лунки вносят по 0,1 см3 раствора инертного белка, при
готовленною. как указанов п. 2.7.22. и помещают в термостат
на 30 мин.
Микропанели повторно промывают инкубационным буферным
раствором три раза по 5 мин.
21.2.2. Р а з в е д е н и е с ыв о р о то к
Каждую лунку мнкропанели заполняют инкубационным буфер
ным раствором в объеме 0,1 см3.
11 первую лунку первого горизонтального ряда, предназначен
ного для контроля качества субстрата, добавляют дополнительно
0,1 cv3 указанного буферного раствора (отрицательный контроль).
В первую лунку второго горизонтального ряда вносят 0,1 см3
отрицательной сыворотки (отрицательный контроль).
В первую лунку третьего горизонтального ряда вносят 0.1 см3
специфической положительнойсыворотки,приготовленной, как
указано в п. 21.2.2 (положительный контроль).
В первую и пятую лунки остальных горизонтальных рядов вно
сят по 0,1 см3 исследуемых парных проб сывороток, предваритель
но разведенных 1:100 в инкубационном буферном растворе в от
дельных пробирках или планшетах.
Содержимое всех рядов титруют методом двукратных разве
дений в объеме 0.1 см3 в четырех лунках, используя при этом пи
петки или сменные наконечники к микронипеткам, и получают