ГОСТ Р 52616—2006
7.15.4 Обработка результатов
Вакцинусчитают безвредной, если все кролики втечение 10 сут после ее введения остаются живы
ми. Допускается образование отеков на месте введения вакцины, повышение температуры тела у
отдельных животных.
7.16 Определение иммуногенной активности
7.16.1 Материалы, реактивы, животные
Флаконы стеклянные вместимостью 50 см3.
Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.
Пипетки стеклянные мерные исполнений 1, 2. 3, 4. 5. 6 вместимостью 1.0. 5.0. 10.0 см3 по
ГОСТ 29230.
Пробки резиновые или ватно-марлевые.
Тампоны ватные.
Иглы инъекционные № 0416—0426 по ГОСТ 25377.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Раствор физиологический с pH (7.0 i 0.2) (1).
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ Р 51652.
Культура сибиреязвенная вирулентная для морских свинок — штамм 2-й вакцины Ценковского
(М-71 — стандартная заражающая сибиреязвенная культура или 71/12).
Морские свинки массой 350—400 г.
7.16.2 Подготовка к испытанию
Для испытания используют смесь равных объемов вакцины из трехампул или трехфлаконов, при
готовленную по7.7.1.2. Для этого 12 клинически здоровых морскихсвинок массой 350—400 г иммунизи
руют вакциной подкожновобластьживота вдозе по 10.0—12.0 млн спор вобъеме0.5см3и 10 свинок той
же массы оставляют для контроля.
7.16.3 Проведение испытания
Через 12—14 сут после вакцинации 10 животных из числа вакцинированных и 10 контрольных
(невакцинированиых) морских свинок подвергают заражению сибиреязвенной стандартной культурой
(штамм 2-й вакцины Ценковского М-71 или 71/12)вдозе по(1.0» 0.1) млн жизнеспособныхспор. Культуру
вводят подкожно в области живота в объеме по (0,50 ± 0,05) см3 каждому животному.
Срок наблюдения за животными — 10 сут после заражения.
7.16.4 Обработка результатов
Не менее восьми издесяти неиммунизированных морских свинок должны погибнуть, а вакциниро
ванные — не менее восьми из десяти должны остаться живыми в течение 10 сут после заражения.
Вслучае падежабольшогочисла вакцинированных морскихсвинок иммуногенные свойства вакци
ны проверяют, как указано в 7.16. на удвоенном количестве животных.
Вслучае получения неудовлетворительных результатов вповторной проверке иммуногенные свой
ства вакцины проверяют количественным методом в сравнении с референс-препаратом вакцины из
штамма 55-ВНИИВВиМ, как указано в 7.16.5.
7.16.5 Определение иммуногенной активности вакцины количественным методом
Метод основан на определении 50 %-иой иммунизирующей дозы (ИмД50) вакцины в сравнении с
ИмД50 референс-препарата вакцины из штамма 55-ВНИИВВиМ.
7.16.5.1 Подготовка к испытанию
Изсухой или жидкой вакцины, подготовленной по 7.7.1.1 и референс-препарата вакцины из штам
ма 55-ВНИИВВиМ. делают разведения на стерильном физиологическом растворе с содержанием
10 млн, 2 млн, 400 тыс. и80 тыс. живых спор в1см3. Приготовленными суспензиями спор каждого издвух
указанных препаратов иммунизируют 30 клинически здоровых морских свинок массой 350—400 г под
кожно в область живота вобъеме по 0,5 см3. Споровую культуру каждого разведения вводят семи или
восьми животным — на две первыедозы берут по восемь, надве последние меньшие дозы — по семь
животных, с тем, чтобы ко времени заражения в живых осталось не менее шести морских свинок.
7.16.5.2 Проведение испытания
Через 12— 14 сут пошесть морских свинок, иммунизированных вакциной из штамма 55-ВНИИВВиМ
и референс-препаратом вакцины из штамма 55 ВНИИВВиМ, вакцинированных каждой дозой споровых
культур ишестьневакцинированиых клинически здоровых морских свинок, заражают вирулентной сиби
реязвенной культурой, как указано в 7.16.3.
7.16.5.3 Обработка результатов
Все неиммунизированные морские свинки должны погибнуть втечение 10 сут. Допускается выжи
вание одной невакцинированной морской свинки.
14