ГОСТ Р 52616—2006
Для приготовления 1,3 %-мого агара берут триптического перевара сердца — 2,4 дм3, мясной
воды — 2,4 дм3,водопроводной воды — 7.2 дм3, 0,5 %-иого раствора NaCI — 60 см3. 20 %-ного раство ра
NaOH — 7,0 см3 и агара (в % к общему объему) — 1.3 %.
Среду стерилизуют вавтоклаве 30 мин при температуре (110i5 ) °С. Содержание аминного азота в
среде должно составлять от 160 до180 мг/%, pH среды до стерилизации 7,7—7,8, после стерилизации
7,4—7.6.
Для проведения испытания используют вакцину из штамма 55-ВНИИВВиМ вразведении (10 5)по
7.7.1.2. Из полученного разведения вакцины делают посевы по (0,10
i
0,01) см3 на три чашки Петри с
1.3 %-ным агаром, приготовленным на триптическом переваре сердца. Посевы инкубируют в течение
20—24 ч при температуре (37 ± 1) вС.
7.12.3 Обработка результатов
Колонии, выросшие на поверхности 1,3 %-ного агара, приготовленного на триптическом переваре
сердца в чашках Петри, должны быть однородными (круглые, приподнятые над поверхностью агара,
выпуклые, шероховатые, желтовато-белого цвета, диаметром 3—4 мм). Наличие диссоциативных
форм колоний, отличающихся по форме, цвету, консистенции и размеру, не должно превышать 5 %.
7.13 Определение подвижности культуры штамма 55-ВНИИВВиМ
7.13.1 Аппаратура, материалы и реактивы по 7.7.1.1.
7.13.2 Проведение испытания
МПБ ииспытуемуювакцину из штамма 55-ВНИИВВиМ готовятпо7.9.2. Из18—24 чмикробнойкуль
туры, выращенной вМПБ.какуказанов7.10.2, напредметныхстеклахготовят пообщепринятым методи
кам «раздавленную или висячую капли» и просматривают с помощью микроскопа с фазоконтрастным
устройством при увеличении 400- — 600".
7.13.3 Обработка результатов
В «раздавленной или висячей каплях» под микроскопомдолжны быть только неподвижные палоч
ки и цепочки, состоящие из палочек.
7.14 Определение капсулообразования
7.14.1 Аппаратура, материалы и животные
Холодильник любой марки температурой (4 ± 2) °С.
Термостат температурой (37
±
1) X .
Центрифуга с ускорением (5—10) х 103об/мин
(q
= 9.8 м/с2 ).
Флаконы стеклянные вместимостью от 20 до 100 см3.
Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.
Пипетки стеклянные мерные исполнений 1,2, 3,4. 5, 6 вместимостью 1,0, 5.0 и 10.0 см3по ГОСТ
29230.
Стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284.
Пробки резиновые.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Шприц вместимостью 5 см3 по ГОСТ 22967.
Иглы инъекционные № 0625 по ГОСТ 25377.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Вода водопроводная по ГОСТ Р 51232.
Раствор физиологический с pH (7.0 i 0,2) [1].
Сыворотка крови крупного рогатого скота по нормативному документу.
Водяная баня.
Гидрокарбонатная магниево-кальциево-натриевая природная минеральная вода по нормативно
му документу.
Эфир для наркоза по нормативному документу.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ Р 51652.
Мыши белые массой 18— 20 г.
Синька Леффлера или краска Романовского-Гимза.
7.14.2 Проведение испытания
Для проведения испытаний на капсулообразование используют среду «Казань», состоящую из
60 %-ной природной минеральной {гидрокарбонатной магниево-кальциево-натриевой) стерильной
воды и40 %-ной стерильной неконсервированной сыворотки крови крупного рогатого скота, инактиви
рованной при температуре 56 °С. Приготовленную среду разливают в стерильные пробирки, которые
закрывают стерильными резиновыми пробками. При этом следует обратить внимание на то. чтобы уро-
12