22
Приложение Б
(справочное)
Принцип проведения многоуровневых испытаний наноматериала
на опасность для здоровья человека
Б.1 Введение
Накопление данных об опасности представляет собой поэтапный процесс, который обычно начинают с общей оценки цитотоксичности наноматериала методами in vitro и компьютерного моделирования. После подтверждения того, что токсичность данного наноматериала достаточно низка и не требует дальнейших исследований, дополнительно оценивают для более конкретных условий механизмы действия и влияние различных способов распространения токсичности. Испытания на животных должны следовать после начального уровня испытаний, для того чтобы проверить адекватность результатов испытаний, полученных методами, не использующими животных.
На уровнях испытаний I и II в настоящее время используют отборочные испытания на основе биологических исследований, а также методы in vitro, поддающиеся глубокому анализу. Эти испытания помогают понять механизмы токсичности материала, но не дают достоверной количественной информации о значениях показателей токсичности, опасных для человека и других живых существ. Выбор клеточной (генетически однородной) линии крайне важен, поскольку иммортализованные линии клеток могут не соответствовать способам функционирования, показательным для человека.
Б.2 Уровни испытаний
Б.2.1 Уровень I. Общее определение токсичности
Основной целью уровня I данной стратегии испытаний является предоставление пользователю доступных, достоверных, экономически эффективных методов оценки общей токсичности исследуемого наноматериала. Результаты испытаний уровня I позволяют пользователю оценить токсичность наноматериала и принять решение о необходимости дальнейшего его исследования или передачи данного наноматериала на доработку для снижения токсичности.
Б.2.2 Уровень II. Специальные испытания, включающие исследование способов попадания наноматериала в организм
Основной целью испытаний уровня II является оценка более конкретных механизмов действия и способов распространения токсичности. Эти испытания должны помочь начальному пониманию мест и точек токсичности в организме человека и служат в качестве отборочных методов на ранних стадиях разработки наноматериала. Стратегия испытаний уровня II применительно к наноматериалам должна быть разработана после исследования физических и химических свойств наноматериалов и ожидаемых сценариев их распространения.
Дополнительные исследования на «модели тела человека» применяют для оценки in vitro опасности возникновения легочных и онкологических заболеваний, неврологических болезней, снижения репродуктивной функции, сердечно-сосудистых заболеваний и распространения токсичности, индуцируемой наноматериалом. Рекомендуется также проведение исследований по методу ADME1 на клеточном и внутриклеточном уровнях, а также изучение характеристик взаимодействия между наноматериалами и клетками. Метод ToxCast позволяет получить достаточно достоверные оценки и/или оценки на основе компьютерного моделирования, применимые к наноматериалам.
Некоторые испытания могут быть модифицированы из существующих методов испытаний на токсичность или специально спроектированы для исследования токсичности наноматериала при конкретном способе проникновения наноматериала в организм человека. После определения путей экспозиции и дозы токсичности цитотоксичность для клеток в местах попадания наноматериала в организм человека может быть оценена с помощью различных методов in vitro, адаптированных к конкретному наноматериалу, включая оценки легочной токсичности, нейротоксичности, неблагоприятного воздействия на внутриутробное развитие и отдаленных последствий токсичности.
Б.2.3 Уровень III. Валидированные методы испытаний OECD, применимые к наноматериалам
Данный уровень испытаний следует применять к наноматериалам, для которых предполагается коммерческое использование и для которых испытания уровня II не дали результатов по определению их токсичности. В зависимости от намеченного использования продукции данные испытания могут соответствовать испытаниям на более ранних стадиях.
Б.2.4 Уровень IV. Испытания на основе результатов предыдущих уровней
На данном уровне могут быть использованы валидированные руководства и нормативные документы по испытаниям для определения риска, соответствующего наноматериалу, разработанному для коммерческого применения. Поскольку применения наноматериалов очень различны (компьютеры, спортивные товары, промышленные
1ADME—Absorption, Distribution, Metabolism and Excretion (всасывание, распространение, метаболизм и экскреция).