С. 5 ГОСТ 26972-86
3.2.9. Приготовление раствора кристалл виолета массовой концентрацией 0,01 г/см3 (см.
приложение I п. 7)
В 80 см3 подогретой до 60 *С дистиллированной волы растворяют 1 г кристалл виолета при
постоянном встряхивании в мерном сосуде с притертой пробкой. После охлаждения раствора до
температуры (45 ± 5) ’С объем доводит до 100 см3. Из этого основного раствора готовят рабочий
раствор путем разведения дистиллированной водой в соотношении 1 : 9. Раствор хранят в темном
закрытом флаконе при комнатной температу ре не более 3 мес. Добавляют в питательные среды для
выявления бактерий группы кишечных палочек.
3.2.10. Приготовление спиртового раствора нейтрального красного массовой концентрацией
0.01 г/см3 (см. приложение 1 п. 8).
В 100 см3оптового ректификованного спирта растворяют 1г кристаллического нейтрального
красного при постоянном встряхивании. Раствор хранят в закрытом сосуде при постоянной темпе
ратуре (комнатной) не более 3 мес.
Добавляют в питательные среды для выявления бактерий группы кишечных палочек.
3.2.11. Приготовление водного раствора бриллиантового зеленого массовой концентрацией
0,005 г/см3 (см. приложение 1 п. 9)
0,5 г бриллиантового зеленого растворяют в 100 см3дистиллированной воды. Хранят в посуде
из темного стекла при комнатной температуре не более 3 мес. Добавляют в питательные среды для
выявления бактерий группы кишечных палочек.
3.2.12. Приготовление раствора лимонной кислоты (см. приложение I п. 10)
20 г лимонной кислоты переносят в мерную колбу, доводя дистиллированной водой объем до
100 см3, растворяют, разливают в пробирки (колбы) и стерилизуют при температуре ( 121± 2) "С в
течение 20 мин.
Применяют для подкисления питательных сред.
3.2.13. Приготовление дрожжевого экстракта
100 г пекарских прессованных дрожжей нарезают небольшими кусочками и запивают 500 см3воды,
подобрав посуду для приготовления экстракта с учетом того, чтобы смесь занимала ’Д вместимости.
Смесь ставят в термостат (сушильный шкаф) при температуре от 58 до 60 *С на 2 сут и
встряхивают 1—2 раза в сутки. Конец автолиза устанавливают по полному разжижению дрожжей.
Экстракт должен иметь коричневый оттенок и приятный запах.
5 см3жидкого дрожжевого экстракта равноценны 1г дрожжевого экстракта в порошке. Хранят
в стеклянной посуде из темного стекла с добавлением 8—10 см3хлороформа.
Добаапяют в качестве компонента для питательных сред как источник веществ, способствую
щих регенерации поврежденных микроорганизмов.
Хранят не более 14 сут.
3.2.14. Приготовление среды из сухого питательного агара с дрожжевым экстрактом и глюкозой
(см. приложение I п. II)
30—35 г СПА, 2.5 сухого или 12,5 см3жидкого дрожжевого экстракта, I г глюкозы растворяют
в 1000 см3 дистиллированной воды путем нагревания до полного растворения всех компонентов,
фильтруют через вату, охлаждают до (50 ± 5) *С и устанавливают pH (6,9 ±0,1), разливают в
колбы и стерилизуют при температуре (121 ± 2) *С в течение 15 мин.
Среду хранят при температуре (6 ± 2) "С не более 14 сут.
3.2.15. Приготовление глюкозпого агара с гидролизатом казеина и с дрожжевым экстрактом
(см. приложение 1 п. 12)
В 1000 см3дистиллированной воды растворяют 5 г панкреатического (энзиматического) казе
инового гидролизата, 2,5 сухого или 12,5 см3 жидкого дрожжевого экстракта, 1 г глюкозы и 15 г
агара, смесь периодически помешивая, нагревают до кипения и кипятят до полного растворения
всех компонентов, охлаждаютдо (50 ±5) *С и устанавливают pH (7,3 ±0,1). Среду разливают в колбы
или флаконы, стерилизуют при температуре (121 ± 2) *С в течение!5 мин. Среду хранят при
температуре (6 ± 2) ‘С не более 14 сут.
3.2.16. Приготовление среды Кесслер-Свенартой (см. приложение I п. 13)
10 г пептона, 50 см3жидкой или 5 г сухой желчи, 1000 см3 дистиллированной воды кипятят
20—30 мин, фильтруют через вату, добавляют 10 г лактозы и доводят объем до 1000 см3, устанавли
вают pH 7,4—7,6, добавляют 4 см3 раствора кристалл виолета. Среду разливают в пробирки с
поплавками по 9 см3 и стерилизуют при температуре (115 ± 2) *С в течение 20 мин. Среда имеет
фиолетовый цвет. Среду хранят при температуре (6 ± 2) *С не более 14 сут.