ГОСТ 26972-86 С. 10
чем через 15 мин 15—20 см3 расплавленную и охлажденную до (45 ± 5) *С одну из агаризованных
сред, приготовленную по пи. 3.2.22 или 3.2.23.
Среду немедленно тщательно перемешивают с исследуемым материалом и оставляют для засты
вания. После застывания среды посевы термостатируют крышками вверх при температуре (24 ± I)‘С и
течение 120 ч.
Если требуется проводить не количественный умет, а альтернативный, то есть определять
наличие или отсутствие плесневых грибов и дрожжей в определенной массе продукта, то продукт и
(или) его соответствующие разведения высевают непосредственно в одну из сред по пп. 3.2.22 или
3.2.23 без агара.
Посевы на жидких средах термостатируют при температуре (24 ± 1) "С втечение 72 ч, ежедневно
наблюдая за появлением роста микроорганизмов.
На плотных средах проводят предварительный учет типичных колоний через 72 ч термостати-
рования посевов и окончательный учет через 120 ч.
На поверхности плотной среды развитие плесневых грибов характеризуется появлением пу
шистого паутинообразного или ватообразного роста.
В жидкой среде рост плесневых грибов имеет вид комочков ваты, тяжей и нитей, со временем
оседающих на дно пробирки.
Я>я подтверждения роста плесневых грибов делают пересевы на плотные среды и подтверждают
рост характерных колоний.
Дрожжи на поверхности азотной среды образуют атоские, иногда выпуклые колонии белого
или кремового цвета. В глубине агара дрожжи образуют чечевинеобразные колонии.
Развитие дрожжей в жидких средах сопровождается появлением в посевах помутнения, газа,
запаха брожения.
Язя подтверждения роста дрожжей их изучают. Язя этого готовят препараты из жидких сред с
признаками роста дрожжей и не менее, чем из пяти характерных колоний на плотных средах.
На середину чистого, обезжиренного предметного стекла наносят каплю стерильной дистил
лированной или водопроводной воды, в которую вносят бактериологической петлей небольшое
количество исследуемого материала так, чтобы капля жидкости стала слегка мутноватой. Допуска ется
из жидких сред препарат готовить без капли воды. Излишек микробного материала на петле сжигают
в пламени горелки. Исследуемый материв! равномерно распределяют по стеклу, просуши вают на
воздухе и фиксируют трехкратным проведением через пламя горелки.
При приготовлении на одном стекле одновременно нескольких мазков лицевую сторону стекла
делят восковым карандашом на необходимое количество секторов.
На препарат после его фиксации накладывают полоску фильтровальной бумаги и наливают
раствор фуксина Пфейфера или метиленовой сини, приготовленных по пп. 3.2.7 или 3.2.8 на 3—5
мин, промывают водопроводной водой, подсушивают и микроскопируют. Окрашенный фон пре
парата слабее, чем дрожжевые клетки.
Дрожжевые клетки значительно крупнее бактериальных. Диаметр их достигает 8—10 мкм.
Форма дрожжевых клеток разнообразная: яйцевидная, эллиптическая, цилиндрическая, лимоновид
ная или шаровидная, при почковании на поверхности дрожжевых клеток видны бугорки.
4.3.3 Обработка результатов
Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
Уточняют число плесневых грибов на чашках, где выросло их от 5 до 50 колоний и (или) от 15
до 150 колоний дрожжей и пересчитывают на 1 г продукта. Для этого находят среднее арифмети
ческое число колоний плесневых грибов и (или) дрожжей, округляют его как указано в п. 4.1.3,
умножают на степень разведения и делят на количество посевного материала (объема), внесенного в
чашку. Количество плесневых грибов и дрожжей записывают в виде числа (от 1,0 до 9.9 )х 10*.
Например. 150 клеток в 1 г записывают как 1,5 х 10* кл/r. При посеве в жидкие среды результат
записывают как «обнаружены» или «не обнаружены» плесневые грибы (или) дрожжи в анализируе
мой навеске продукта.