ГОСТ 26972-86 С. 4
3. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
3.1. Подготовка посулы и материалов
3.1.1. Посуду, предназначенную для микробиологического анализа, моют, а новую — допол
нительно кипятят в подкисленной воде (раствор соляной кислоты объемной долей 1—2 %) в течение 15
мин, затем ополаскивают дистиллированной водой и стерилизуют.
Посуду стерилизуют в сушильном шкафу при температуре 160—165 ’С в течение 2 ч или в
стерилизаторе при температуре (121 ± 2) С в течение 30 мин с последующим подсушиванием.
Чашки Петри, пипетки стерилизуют завернутыми в бумагу или в металлических пеналах. В
коней пипетки предварительно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют в стери
лизаторе, завернутыми в бумагу.
Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах.
3.1.2. Посуду, инструменты и материалы, соприкасающиеся с продуктом во время отбора проб,
стерилизуют одним из способов:
насыщенным паром в стерилизаторе при температуре (121 ± 2) "С 30 мин;
горячим воздухом в сушильном шкафу при температуре 180—185 “С 15 мин или температуре
160-165 *С 120 мин;
обработкой путем погружения в этиловый спирт с последующим фламбированием.
3.2. Приготовление растворов и питательных сред
3.2.1. Для пригото&тення растворов и питательных сред применяют дистиллированную воду
по ГОСТ 6709—72, если нет специальных указаний, и реактивы квалификации «х.ч» и «ч.д.а».
3.2.2. Необходимое значение pH растворов и питательных сред устанаатвают с помощью
раствора гидроокиси натрия массовой концентрации 0,1 г/см3 или раствора соляной кислоты
объемной долей К)
%.
pH растворов и питательных сред определяют с помощью потенциометрического анатизатора
по прилагаемой к нему инструкции.
Ориентировочное определение pH растворов и питательных сред допускается проводить с
помощью индикаторной бумаги.
3.2.3. Приготовление пептонно-солевого раствора (см. приложение I п. 1)
0.85 г хлористого натрия и 0,1 пептона растворяют в 100 см’ дистиллированной воды при
медленном нагревании, при необходимости фильтруют через бумажной фильтр, устанавливают pH
(7,0 ± 0,1); разливают в колбы, пробирки и стерилизуют при температуре (121 ± 2) *С в течение
30 мин. Хранят при температуре (6 ± 2) “С не более 7 сут.
Применяют для приготовления разведений.
3.2.4. Приготовление карболового раствора генциана виолета (см. приложение 1 п. 2)
1 г генциан пиолета. 10 см3спирта этилового ректификованного, 5 гфенола растирают вступке,
добавляя 100 см* дистиллированной воды.
Применяют для окраски препаратов по Граму.
3.2.5. Приготовление раствора Люголя (см. приложение 1 п. 3)
I г кристаллического йода, 2 г йодистого калия растворяют в 300 см3дистиллированной воды.
Хранят во флаконах из темного стекла.
Применяют для окраски препаратов по Граму.
3.2.6. Приготовление фуксина Циля (см. приложение 1 п. 4)
1г основного фуксина. К) г этилового ректификованного спирта. 5 гфенола растирают вступке,
добавляя 100 см3дистиллированной воды.
Применяют для окраски препаратов по Граму.
3.2.7. Приготовление раствора фуксина по Пфейфферу (см. приложение 1 п. 5)
К 1 см3 карболового фуксина Циля приливают 9 см3дистиллированной воды. Раствор очень
нестойкий. Готовят в небольших количествах непосредственно перед использованием.
Применяют для окраски дрожжей.
3.2.8. Приготовление раствора метиленового синего до Леффлеру (см. приложение 1 п. 6)
30 см3 насыщенного спиртового раствора метиленового синего (8—9 г метиленового синего в
100 см3этилового спирта), профильтрованного через бумажный фильтр, и 1см3раствора гидроокиси
капия массовой концентрации 0.01 г/см3прибавляют к 100 см3дистиллированной воды.
Растворяют и хранят в темной посуде при температуре (6 ± 2) "С не более 30 сут.
Применяют для окраски дрожжей.