С. 7 ГОСТ 10444.11-89
1
1
100
ков вида S.thermophilus и стрептококков группы N рода Streptococcus —наличие роста в мясопептон-
иом бульоне с pH 9,6 и в мясопептонном бульоне с 6.5% NaCl.
4.1.8.1. Для определения отношения микроорганизмов к окраске по Граму из катаний приготав
ливают мазки, окрашивают их по ГОСТ 30425 и микроскопнруют.
4.1.8.2. Для изучения подвижности микроорганизмов из колоний приготавливают препараты ме
тодом висячей или раздавленной капли и микроскопируют. Результаты микроскопирования оценивают
в соответствии с приложением I.
4.1.8.3. Каталазную активность культур определяют по ГОСТ 30425.
Результаты определениякаталазной активности оцениваютв соответствии сприло
жением .
Разложение перекиси водорода у бактерий рода Pediococcus возможно за счет фермента псевдока
талазы. Поэтому при определении молочнокислых микроорганизмов или бактерий рода Pediococcus в
случае, если в характерных колониях обнаружены неположительные, неподвижные микроорганиз
мы. дающие положительную каталазную реакцию, контролируют отсутствие цито-хромов путем по
становки бензилиновоготеста. Для этого выросшие на чашках Петри колонии бактерий 24 48-часово го
возраста заливают раствором бензидина, указанным в п. 3.1.9. После того, как раствор пропитает
катании, прибавляют в чашку приблизительно такой же объем 5%-ной перекиси водорода. Молочно
кислые микроорганизмы, в том числе бактерии рода Pediococcus, не содержат цитохромов. 13случае
присутствия цитохромов колонии окрашиваются в голубовато-зеленый или ярко-голубой цвет.
При отсутствии бензидина допускается проводить определение наличия псевдокаталазы на среде
п. 3.2.15 с низкой концентрацией глюкозы —0,05%.
Посевы инкубируют по п. 4.1.4, определение псевдокаталазы проводят также как и каталазы по
ГОСТ 30425.
Культуры, образующие псевдокаталазу, относят к роду Pediococcus.
4.1.8.4. При идентификации бактерий рода Leuconostoc готовят препараты и окрашивают их по
Бури для выявления бактериальных капсул. Для этого на хорошо обезжиренном и обожженном пред
метном стекле смешивают каплю бактериальной культуры с мелким порошком черной туши или
суспензией нигрозина.
С помощью другого стекла со шлифованными краями быстро готовят тонкий мазок, который
фиксируют, нескатько раз проводя его через пламя горелки. Мазок докрашивают раствором кристал
лического фиолетового или рабочим раствором карболфуксина. Осторожно промывают в сосуде с
водой, остааляют на воздухедля высыхания и микроскопируют. Не допускается сушить мазок между
листами фильтровальной бумаги. Фон препарата окрашивается тонкой суспензией черной туши или
нигрозина. Тела бактерий окрашиваются монохроматично, капсулы остаются неокрашенными.
4.1.8.5. При идентификации стрептококков группы N рода Streptococcus, стрептококков вида S.
thermophilus определяют отсутствие роста на мясопептонном бульоне с pH 9,6 и на мясо-пептонном
бульоне с содержанием хлористого натрия 6.5%.
Для этого культуры по п. 4.1.8 пересевают на среды, указанные в пп. 3.2.8 и 3.2.9.
Посевы инкубируют при температуре (30±1)*С в течение 3 сут, а при идентификации
S. thermophilus посевы инкубируют при (45±1) *С втечение 3 сут.
4.2.Проведение испытания кисломолочных проектов, заквасок, бактериальных концентра
тов н бактериальных препаратов молочнокислых бактерий
4.2.1. Приготовление разведений кисломолочных продуктов (сухих и жидких) по ГОСТ 9225.
Для приготовления разведений заквасок, бактериальных концентратов и бактериальных препара
тов молочнокислых бактерий края флакона и пакета протирают спиртом, край флакона обжигают и
вынимают пробку, край пакета надрезают профламбированными ножницами, отвешивают г испы
туемого материала в стерильную или профламбнрованную ступку, прикрытую крышкой от чашки
Петри или стерильной бумагой, тщательно растирают, добавляя небольшое количество раствора
хлористого натрия или фосфатного буфера из калбы. содержащей 99см
5
раствора или буфера. Суспен
зированный материал переливают в калбус оставшимся раствором хлористого натрия или фосфат
ного буфера и получают второе разведение I :.
И вторых разведений кисломолочных продуктов, заквасок, бактериальных концентратов и бак
териальных препаратов молочнокислых бактерий готовят следующие разведения в соответствии с
количеством молочнокислых бактерий, указанным в нормативно-технической документации,
пользуясьтабл.
1
.
288