ГОСТ Р ИСО 10993.11-99
ПРИЛОЖЕНИЕ Б
(Справочное)
Методики исследования общетоксического действия
Б. 1 Определение острой токсичности на белых мышах
Б. 1.1 Средства исследований
Весы лабораторные типа ВЛКТ-500 но ГОСТ 24104.
Ширины объемом 2 мл.
Лупа.
Б. 1.2 Ход исследования
Вытяжки из изделий исследуют на беспородных белых мышах (самцах) массой 18 —25 ч. прошедших
7-суточный карантин. Вопытной и контрольной группахдолжно быт ь не менее восьми животных. Вытяжки
в количестве 50 мл на 1 кг массы тела животных вводят однократно внутрибрюшинно. Животным
контрольной группы в том же объеме вводят модельную среду. Состояние животных оценивают но
следующим тестам:
- масса тела в граммах —определяют до введении вытяжек и через сутки после введения, натощак;
- общее состояние животных: поведение, подвижность, состояние шерстного покрова —сразу после
введения, через 4 и 24 ч после введения;
- макроскопическая оценка состояния внутренних органов итканей на вскрытии. Животных умерщвляют
декантацией через 24 ч после введения вытяжки. Сначала вскрывают контрольную группу, зачем подопытную,
обратная внимание на область введения вытяжки, состояние подкожной клетчатки, брюшины, мыши брюшной
стенки, регионарных лимфоузлов и их протоков, внутренних органов;
- взвешивание внутренних органов (печени, почек, селезенки): определение коэффициентов массы
внутренних органов делением массы органа в миллиграммах на массу тела в граммах. Полученные данные
подлежат статистической обработке с использованием критерия Стьюдснта I. При получении достоверной
разности двух исследуемых показателей опытной и контрольной труни вытяжку из изделия признаюттоксичной.
При обнаружении достоверною отличия по одному из показателей состояния животных испытании следует
повторить на удвоенном количестве животных. При повторном обнаружении достоверных различий изделие
считают токсичным. Вслучае гибели одного-двух животных исследование повторяют на удвоенном количестве
животных (по 16 мышей в каждой группе). При гибели хотя бы одною подопытною животною при повторном
исследовании изделие считают токсичным.
Б.2 Исследование на пнротенностъ на кроликах
Б.2.1 Средства исследований
Шприцы объемом 2 мл.
Термометр медицинский.
Б.2.2 Ход исследования
Отбор, содержание, подготовку животных к исследованиям, повторность их использовании проводят по
Государственной Фармакопее XI издания.
Тест-доза — 10 мл на килограмм массы кролика. Вытяжку вводят в ушную вену.
Исследуемую партию изделий считают алирогенной. если после введения вытяжки ни у одного из грех
подопытных кроликов ни при одном из трех измерении нс наблюдалось повышение температуры больше чем на
0.6 *С по сравнению с исходной температурой и в сумме повышение температуры при каждом измерении у грех
кроликов нс превышало 1.4 СС.
П р и м е ч а н и е —За партию изделий принимают количество изделий, простерилизовакных за сутки
радиационным способом или за один цикл стерилизации в одном стерилизаторе при газовом способе
стерилизации.
Если у одного или двух кроликов температура повысилась более чем на 0.6 *С и в сумме при каждом
измерении у трех кроликов повышение температуры составило более 1.4 ’С. исследование повторяют допол
нительно на пяти кроликах.
Партию изделий считают апирогенной. если не более чем у трех из восьми кроликов наблюдалось
индивидуальное повышение температуры нс более чем на 0,6 *С и общая сумма повышений температуры у всех
восьми кроликов не превышала 3.7 ’С.
Допускается максимальное снижение температуры на 0,6 ‘С. При снижении температуры у одного
кролика более чем на 0,6 ’С исследование повторяют на пяти кроликах.
Партию изделий считаютапирогенной, если посте повторного исследования ни уодного из пяти кроликов
максимальное понижение температуры нс превысило 0,6 ’С и нс более чем удвух кроликов из пяти температура
понизилась на 0.6 ‘С но сравнению с исходной. В противном случае партию изделий бракуют.
9