ГОСТ Р ИСО 20776-1—2022
3.13инокулюм-эффект (inoculum effect): Изменение МПК, связанное с изменением концентра
ции инокулюма, выраженном в КОЕ/мл.
4 Проведение исследования
4.1 Общие положения
Рабочие растворы распределяют в планшеты для микроразведения по 50 мкл на лунку с удво
енной предполагаемой окончательной концентрацией антимикробного препарата (и последующим до
бавлением бактериального инокулюма в объем 50 мкл в каждую лунку) или по 100 мкл на лунку с пред
полагаемой окончательной концентрацией антимикробного препарата (и последующим добавлением
инокулюма в объеме не более 10 мкл). По крайней мере одна лунка, содержащая 50 мкл или 100 мкл
питательной среды без антимикробного препарата, должна быть использована как контроль роста для
каждого проверяемого штамма. Аналогично одна лунка, содержащая 100 мкл среды без антимикробно го
препарата, должна быть оставлена неинокулированной и использована для отрицательного контро ля
для каждого проверяемого штамма.
4.2 Питательная среда
Следует использовать бульон Мюллера—Хинтон (более подробное описание — см. приложе
ния А и D).
4.3 Антимикробные препараты
4.3.1 Общие положения
Антимикробные препараты должны быть получены непосредственно от изготовителя или из на
дежных коммерческих источников*; использование лекарственных средств неприемлемо. Антимикроб
ные препараты должны поставляться в виде порошка с указанием номера партии, активности, срока
действия и подробным описанием рекомендованных условий хранения. Субстанции следует хранить в
плотно закрытых контейнерах в темном месте с влагопоглотителем при рекомендованной изготовите лем
температуре. Гигроскопические препараты должны быть распределены на аликвоты, при каждом
проведении исследования используют одну из них.
Чтобы избежать конденсации, контейнеры перед вскрытием согревают до комнатной темпе
ратуры.
4.3.2 Приготовление базовых (основных) растворов
Для взвешивания антимикробных препаратов следует использовать калиброванные аналитиче
ские весы. Количество действующей субстанции антимикробного препарата с учетом ее активности или
объема разбавителя, необходимого для приготовления стандартного раствора, вычисляют по форму
лам:
V
т = —
p
—,
(1)
Р
V
..
=
т■Р
Р
(2)
где т— масса антимикробного препарата (порошка), г;
V — объем разбавителя, л;
р — концентрация базового раствора, мг/л;
Р — активность антимикробного препарата (порошка), мг/г.
Концентрация базовых растворов должна составлять 1000 мг/л или больше, вместе с тем раст
воримость некоторых препаратов может не обеспечивать данную концентрацию. Фактические концент
рации базовых растворов зависят от метода подготовки рабочих растворов (последовательных разве
дений). Препараты растворяют и разводят стерильной дистиллированной водой, если изготовителем
* В Российской Федерации в качестве антимикробных препаратов применяют зарегистрированные в
установленном порядке медицинские изделия для диагностики ин витро.
3