ГОСТ Р ИСО 20776-1—2022
4.6 Инкубация планшетов для микроразведений
Для предотвращения высушивания перед инкубацией планшеты для микроразведений должны
быть запечатаны в полиэтиленовые пакеты или закрыты плотной крышкой или клейкой пленкой. Для
предотвращения неравномерного нагревания планшетов стопки, в которые их складывают, должны со
стоять не более чем из четырех планшетов; стопка планшетов должна быть плотно закрыта сверху
единой герметичной крышкой.
Если не указано другое, планшеты для микроразведений инкубируют при температуре (35 ± 1) °С
в течение (18 ± 2) ч при исследовании большинства комбинаций антимикробных препаратов и бакте
рий. Не должно осуществляться инкубирование планшетов в атмосфере, обогащенной С02.
4.7 Интерпретация результатов исследования
Учет результатов исследования проводят только при наличии достаточного роста исследуемого
микроорганизма (т. е. при явном осадке или определяемом помутнении в лунке положительного кон
троля роста), отсутствии роста в лунке, не содержащей инокулюма или отрицательного контроля роста
(при наличии), и при установленной чистоте культуры и соответствующей концентрации инокулюма.
Степень роста в каждой лунке сравнивают со степенью роста в лунке положительного контроля роста.
Наименьшую концентрацию препарата, которая полностью подавляет видимый рост, регистрируют как
МПК. Существуют некоторые исключения из этого правила, на которые пользователю следует обратить
особое внимание (например, постепенное угнетение роста линезолидом, частичное подавление суль
фаниламидами, неполное подавление некоторыми бактериостатическими препаратами).
4.8 Особые случаи при исследовании, при которых результат определения МПК может
быть ненадежным
В некоторых случаях значение МПК может не отражать истинную активность. Поэтому в целях
клинического использования может возникнуть необходимость изменения интерпретации результатов
исследования некоторых антимикробных препаратов. В этих случаях референтный метод должен быть
модифицирован, например путем изменения условий инкубации или введением добавок в среду. Кроме
того, при использовании стандартного метода разведений не всегда могут быть обнаружены опреде
ленные механизмы резистентности, например экспрессия некоторых (3-лактамаз, эффлюксных насосов
или модификация мишеней для препарата. В таких случаях МПК следует интерпретировать с осторож
ностью или использовать другую информацию для принятия клинических решений. В приложении D
приведены некоторые комбинации антимикробных препаратов и бактерий, требующие особого внима
ния.
5 Контроль качества
Достоверность результатов исследования должна отслеживаться с проведением одновременного
исследования контрольных штаммов. Банк контрольных штаммов следует хранить в лиофилизирован-
ном или замороженном виде (при температуре минус 60 °С или ниже). Рабочие культуры готовят с
помощью субкультивирования из банка контрольных штаммов на неселективной питательной агаро вой
среде. Дальнейшие субкультуры могут быть приготовлены из первой рабочей культуры только в
течение одной недели. Каждый день при проведении исследования следует тестировать как минимум
два соответствующих контрольных штамма, если такое возможно. Работу с исследуемыми колониями
контрольных культур проводят таким же образом, как и с обычными культурами. МПК антимикробных
препаратов для контрольных организмов должны быть в пределах диапазонов, приведенных в послед
них версиях [15] или [16]. Единую таблицу контроля качества составить невозможно. Различия в разре
шенных питательных средах*, справочных материалах, применении сред разных изготовителей и т. д.
могут быть причиной некоторых различий в допустимых диапазонах значений МПК для контрольных
штаммов микроорганизмов и сказываться на результатах исследований. Кроме того, в результате воз
можной коррекции диапазонов контроля качества вследствие поступления новых данных, могут быть
установлены новые диапазоны, которые не отражены в настоящем стандарте. Наконец, могут появить-
* Для медицинских целей в Российской Федерации применяют зарегистрированные в установленном по
рядке питательные среды, относящиеся к медицинским изделиям для диагностики ин витро.
6