ГОСТ 30711-2001
ВрИШ)удвржмибжн,11Ш
относительной погрешностью измерения интенсивности флюоресценции не более 2 %. пределом
детектирования по антрацен)’ 8-10“12г/см3;
регистрирующего устройства (самописца или интегратора), позволяющего проводить измере
ния при чувствительности 0.2 мВ/см. с погрешностью записи в рабочих условиях не более 0.5 %;
колонки длиной 250 мм и внутренним диаметром 4.6 мм. заполненной силикагелем с размером
частиц 5 мкм. Эффективность колонки по афлатоксину В, —не менее 20000 теоретических тарелок
на метр.
Толуол по ГОСТ 5789. ч. д. а.
Эфир этиловый уксусной кислоты по ГОСТ 22300. ч. д. а.
Кислота муравьиная по ГОСТ 5848. ч. д. а.
4.3 Условия измерений
Температура и относительная влажность влабораторном помещении при выполнении измере
ний не должны превышать значений, оговоренных в нормативных документах на средства измере
ний, указанные в 4.2.
4.4 Подготовка к выполнению измерений
4.4.1 Подготовка растворителей
Подготовка растворителей —по 3.4.1.
4.4.2 Приготовление рабочего раствора смеси афлатоксинов В. и В2
В мерную колбу вместимостью 100 см5пипеткой вносят 1.0 см’ основного раствора афлаток-
сина В, и 0,5 см’ основного раствора афлатоксина В„ приготовленных по 3.4.2. Содержимое колбы
доводят до метки смесыо бензола с ацетонитрилом (98:2 по объему) и тщательно перемешивают.
Массовая концентрация афлатоксинов В, и В; в полученном рабочем растворе составляет около 0,1
мкг/см ‘ и 0,05 мкг/см5соответственно. Точная концентрация афлатоксинов В, и В. в рабочем
растворе соответствует их точной концентрации в основных растворах, деленной на фактор
разведения 100 и 200соответственно. Рабочий растворафлатоксинов В, и В, хранятвтех же условиях,
что и основные растворы, приготовленные по 3.4.2. Срок годности рабочего раствора афлатоксинов
—
1
г.
4.4.3 Приготовление рабочего раствора смеси анатоксинов В., В, и А/,
0.5 см3 рабочего раствора афлатоксина М„ приготовленного по 3.4.4. и 1см3рабочего раствора
смеси афлатоксинов В, и В,, приготовленного по 3.4.3, переносят в мерную колбу вместимостью
10 см3. Объем в колбе доводят до метки смесыо бензола с ацетонитрилом (9:1 по объему).
Содержимое колбы тщательно перемешивают. Массовая концентрация афлатоксина М, в получен
ном рабочем растворе составляет 0,05 мкг/см3, афлатоксинов В, и В ,—около 0.1 мкг/см3 и 0,05
мкг/см3 соответственно. Точная концентрация афлатоксинов В, и В, в рабочем растворе
соответствует их точной концентрации в основных растворах, де
ленной на фактор разведения 100 и 200 соответственно. Рабочий
раствор афлатоксинов В,, В, и М, хранят в тех же условиях, что и
основные растворы, приготовленные по 3.4.2. Срок годности рабо
чего раствора афлатоксинов — 1г.
4.4.4 Подготовка фюризила
Флоризнл готовят по 3.4.5.
4.4.5 Подготовка хроматографа к работе
Готовят смесь толуол-этилацетат-муравьиная кислота (8:4:1),
которую используют в качестве подвижной фазы. На флюоримет-
рическом детекторе устанавливают длину волны возбуждающего
излучения 360 нм и длину волны эмиссии 420 нм. Чувствитель
ность детектора устанаативают таким образом, чтобы при вводе в
хроматограф I иг афлатоксина В, перо самописца отклонялось на
полную шкалу. Чувствительность самописца устанаативают на
10 мВ. Подвижной фазой кондиционируют колонку хроматографа
при скорости потока 1.2 см3/мин в течение 20 мин. после чего
хроматограф считается готовым к работе.
Допускается использование подвижной фазы другого состава,
обеспечивающей разделение пиков афлатоксинов В,, В, и М, не
хуже, чем на образцовой хроматограмме (рисунок 2).
4.4.6 Определениевремениудерживания и градуировочных коэф
Рисунок 2 —Хроматограмма
фициентов аНатоксинов
рабочего раствора смеси
В инжектор хроматографа микрошприцем вводят 0,005 см3
афлатоксинов
11