ГО СТ Р 57513— 2017
10.1.8 В стеклянную пробирку вместимостью 25 см3 вносят 0.1 см3 раствора глюкозы (см. 7.13)и
0.1 см3 раствора ацетатного буфера (см. 7.5).
10.1.9 В каждую пробирку (см. 10.1.6— 10.1.8) добавляют по 3 см3раствора глюкозооксидазного
реагента (см. 7.3). Помещают пробирки на водяную баню при температуре (50 ± 1) СС на 20 мин.
10.1.10 На спектрофотометре измеряют оптическую плотность растворов анализируемой пробы
и глюкозы (см. 10.1.6 и 10.1.8) против «холостой пробы» (см. 10.1.7) при длине волны 510 нм.
П р и м е ч а н и е — Растворы исследуемых образцов с содержанием (1-*3)(1-*4)-р-0-глкжана свыше 10 %
будут иметь значение оптической плотности больше, чем значение оптической плотности у раствора глюкозы. В
этом случае проводят повторный анализ пробы, повторяют процедуры, описанные апунктах 10.1.1— 10.1.5.
впунк те 10.1.6 добавляют в каждую пробирку по 0.1 см3 ацетатного буфера (см. 7.5). Затем повторяют
пункты 10.1.7— 10.1.10. При расчете массовой долир-глюкана (см. 11.1) результат, полученный вформуле (1).
умножают на коэффициент разбавления — 0.5.
10.2Методопределения(1->3)(1-»6НЯЭ-глюканавспециализированнойпищевой
продукции микробиологического происхождения
10.2.1 Определение общего глюкана
10.2.1.1 В две стеклянные пробирки вместимостью 25 см3 вносят пробу массой (0,100 ♦0.001) г
или осадок (см. 7.14.2). добавляют по 1,5 см3концентрированной соляной кислоты и перемешивают на
встряхивателе. Помещают пробирки на водяную баню при температуре (30 ± 1) °С на 45 мин и переме
шивают на встряхивателе каждые 15 мин в течение всего периода инкубирования.
10.2.1.2 Добавляют по 10 см3 дистиллированной воды в пробирки, перемешивают на встряхива
теле.
10.2.1.3 Помещают пробирки на водяную баню при температуре (100 ± 1) °С на 2 ч.
10.2.1.4 Охлаждают пробирки до температуры 20 °С и добавляют по 20 см3раствора гидроокиси
калия (см. 7.12).
10.2.1.5 Количественно переносятсодержимое пробирок вмерные колбы вместимостью 100 см3,
доводят объем до метки раствором ацетатного буфера (см. 7.10).
10.2.1.6 Переносят содержимое колб в полипропиленовые пробирки вместимостью 100 см3 и
центрифугируют при скорости вращения ротора 1500 мин-1 в течение 10 мин.
10.2.1.7 Переносят 0.1 см3 супернатанта встеклянную пробирку вместимостью 25 см3,добавляют
0.1 см3 раствора глюкан-1,3-(илюкозидазы/|Углюкозидазы (см. 7.8). перемешивают на встряхивателе.
Помещают пробирки на водяную баню при температуре (40 ± 1) °С на 60 мин.
10.2.1.8 В стеклянную пробирку вместимостью 25 см3вносят0.2 см3раствора ацетатного буфера
(см. 7.10) — «холостая проба».
10.2.1.9 В стеклянную пробирку вместимостью 25 см3 вносят 0,1 см3 раствора глюкозы (см. 7.13) и
0.1 см3 раствора ацетатного буфера (см. 7.10).
10.2.1.10 В каждую пробирку (см. 10.2.1.7— 10.2.1.9)добавляют поЗсм3 раствора глюкозооксидаз
ного реагента (см. 7.3). Помещают пробирки на водяную баню при температуре (40 ± 1) °С на 20 мин.
10.2.1.11 Измеряютоптическую плотность растворов исследуемой пробы и глюкозы (см. 10.2.1.7 и
10.2.1.9) против «холостой пробы» (см. 10.2.1.8) при длине волны 510 нм.
10.2.2 Определение а-глюкана
10.2.2.1 В две стеклянные пробирки вместимостью 25 см3 вносят пробу массой (0,100 i 0.001) г
или осадок (см. 7.14.2). добавляют по 2 см3раствора гидроокиси калия (см. 7.12). помещают в стеклян
ный стакан, наполненный дистиллированной водой температурой 4 °С и льдом. Стакан с пробирками
помещают на магнитную мешалку при скорости 1000 об/мин на 20 мин.
10.2.2.2 Добавляют в пробирки по 8 см3 раствора ацетатного буфера (см. 7.11). добавляют по
0.2см3раствора смеси глюкан-1,4-сх-глюкозидазы и «-глюкозидазы (см. 7.9), перемешивают на встряхи
вателе и помещают пробирку на водяную баню при температуре (40 ± 1) ®С на 30 мин. периодически
перемешивая (3— 4 раза в течение времени инкубации).
10.2.2.3 Переносят содержимое пробирок в полипропиленовые пробирки вместимостью 20 см3 и
центрифугируют при скорости вращения ротора 1500 мин -1в течение 10 мин.
10.2.2.4 Переносят 0.1 см3супернатанта встеклянную пробирку вместимостью 25 см3,добавляют
0.1 см3 раствора ацетатного буфера (см. 7.10).
10.2.2.5 В стеклянную пробирку вместимостью 25 см3вносят0.2 см3 раствора ацетатного буфера
(см. 7.10) — «холостая проба».
10.2.2.6 В стеклянную пробирку вместимостью 25 см3 вносят 0,1 см3 раствора глюкозы (см. 7.13) и
0,1 см3 раствора ацетатного буфера (см. 7.10).
8