ГОСТ 23454—2016
Допускается использовать культуру дольше, если она не утратила своей активности и по микро
скопическому препарату соответствует предъявленным требованиям: продолжительность сквашива
ния при пересеве — не более 16—18 ч; сгусток плотный, консистенция однородная, допускается мягкая
крупитчатость или вязкая: в поле зрения микроскопа в препарате тест-культуры — диплококки одиноч ные
или собранные в цепочки.
7.2.4 Приготовление рабочей тест-культуры
7.2.4.1 Рабочую тест-культуру готовят из коллекционной тест-культуры в пробирках или колбах в
зависимости от необходимого количества или из сухой бактериальной закваски термофильного молоч
нокислого стрептококка, предназначенной для определения ингибирующих веществ.
7.2.4.2 При приготовлении рабочей тест-культуры из коллекционной в пробирку с 10 см3 стериль
ного обезжиренного молока вносят одну петлю коллекционной тест-культуры, а в колбу со 100 см3 сте
рильного обезжиренного молока вносят 0,1 см3коллекционной тест-культуры или сухой бактериальной
закваски на кончике ланцета и выдерживают в термостате при температуре (41
±
1) °С 16—18 ч до
об разования плотного сгустка.
Полученную рабочую тест-культуру используют для проведения анализа.
В случае необходимости рабочую тест-культуру хранят в холодильнике температурой (4
±
2) °С и
используют в течение 24 ч.
Непосредственно перед применением рабочую тест-культуру перемешивают путем интенсивного
встряхивания.
7.2.5 Приготовление контрольного раствора препарата СКИВ
Для получения контрольного раствора препарата вскрывают флакон с сухим препаратом СКИВ.
Во флакон вносят пипеткой 10 см3дистиллированной воды, подогретой до температуры (50
±
10) °С.
закрывают пробкой и встряхивают до полного растворения.
Контрольный раствор препарата СКИВ готовят непосредственно перед испытанием, после про
ведения испытаний раствор хранению не подлежит.
7.3 Проведение анализа
7.3.1 В чистые пробирки наливают по 10 см3анализируемого молока и закрывают сухими резино
выми пробками. Оставшуюся часть пробы сохраняют до конца анализа в холодильнике при темпера
туре (4
±
2) °С.
При наличии большого количества проб анализируемого молока анализ проводят сериями. Коли
чество пробирок с анализируемым молоком в каждой серии должно быть не более двадцати.
Проводят два параллельных определения одной пробы молока.
7.3.2 Одновременно проводят контрольный анализ. Для этого используют контрольный раствор
препарата СКИВ, подготовленный по 7.2.5.
7.3.3 Пробирки с анализируемым молоком и контрольной пробой нагревают в водяной бане до
температуры (87
±
2) °С и выдерживают при указанной температуре 10 мин, затем охлаждают до тем
пературы (46
±
1) °С и стерильной пипеткой вносят 0.5 см3рабочей тест-культуры, приготовленной по
7.2.4.
Содержимое пробирок тщательно перемешивают трехкратным переворачиванием. Затем пробир
ки выдерживают в течение 75 мин при температуре (45
±
1) °С в жидкостном термостате или водяной
бане.
7.3.4 В пробирки с анализируемым молоком и контрольной пробой вносят по 1 см3 основного
раствора резазурина натриевой соли, подготовленной по 7.2.2. температурой (20
±
2) °С. Содержимое
пробирок перемешивают путем двукратного переворачивания.
7.3.5 Пробирки с анализируемым молоком и контрольной пробой выдерживают в редуктазнике
или водяной бане при температуре (45
±
1) °С в течение 10—15 мин.
7.4 Обработка результатов
При отсутствии в анализируемом молоке (и в контрольной пробе) ингибирующих веществ или их
наличие в количестве равном или меньшем, чем предел обнаружения, содержимое пробирок будет
иметь розовый с сиреневым оттенком или розовый, или белый цвет. При наличии в молоке ингибирую
щих веществ содержимое пробирок будет иметь цвет от серо-сиреневого до сиреневого в соответствии с
приложением А.
5