ГОСТ ISO 14502-2—2015
4.10.2 Кофеин, исходный стандартный раствор массовой концентрации 2,00 мг/см3-
(0.200
±
0.001) г безводного кофеина помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3с одной
меткой. Добавляют теплую воду до половины объема колбы. Перемешивают до полного растворения
кофеина, охлаждают до комнатной температуры. Доводят до метки водой и перемешивают.
4.10.3 Галловая кислота, исходный стандартный раствор массовой концентрации прибли
зительно 1,00 мг/см3
(0,110
1
0,001) г моногидрата галловой кислоты (М = 188.14) помещают в мерную колбу вмести
мостью 100 см3 с одной меткой, доливают примерно до половины колбы водой. Перемешивают до
полного растворения галловой кислоты, добавляют воду до метки и перемешивают.
Приготовленный раствор используют в течение одного дня.
П р и м е ч а н и е — Предпочтительным является использование моногидрата галловой кислоты, вслед
ствие его меньшей гигроскопичности, большей растворимости и наличия реактивов аттестованных классов чисто
ты. например класса ACS. который используют для обозначения реактивов, которые удовлетворяют требованиям,
установленным Американским химическим обществом {American Chemical Society — ACS). Если содержание мас
совой доли воды в исходном реагенте неизвестно, оно должно быть определено по потере массы при температуре
103 *С с использованием части реагента.
4.10.4 Приготовление индивидуальных исходных стандартных растворов катехинов
Стандартные образцы катехиновпомещают в количествах, приведенныхв таблице 1,вотдельные
мерные колбы с одной меткой. Растворяют в стабилизирующем растворе (см. 4.8), осторожно нагревая
при необходимости (максимально до температуры 40 °С). Охлаждают до комнатной температуры,
добавляют стабилизирующий раствор до метки и перемешивают.
Т а б л и ц а 1 — Исходные стандартные растворы катехинов
Компонент раствора
Масса стандартного
образца, г
Объем
стабилизирующего
раствора, см5
Номинальная концентрация
стандартного раствора,
мг/см1
(+)-Катехин (С)
(->-Эпи*атехин (ЕС)
(-)-Эпигаллокатехин (EGC)
(-)-Галлат эпигаллокатехина (EGCG)
(-)-Галлат эпикатехмна (ECG)
0,020 г 0,001
0,020 = 0.001
0,040 с 0.001
0,040 = 0,001
0,040 = 0,001
20
20
20
20
20
1,0
1.0
2.0
2.0
2.0
Если имеетсядостаточное количество катехинов (т. е. более 20 мг), тодля приготовления индиви
дуальных исходных растворов требуются аналитические весы с точностью взвешивания не менее 0.1
мг. Если количество катехиновнедостаточно(т. е. менее20 мг), требуютсяаналитическиевесысточ
ностью взвешивания не менее 0.01 мг.
4.11Градуировочные растворы
4.11.1 Раствор галловой кислоты массовой концентрации примерно 200 мкг/см3-Используя
пипетку, переносят 20 см3исходного раствора галловой кислоты (см. 4.10.3) в мерную
колбу вместимостью 100 см3с одной меткой. Добавляютстабилизирующий раствор (см. 4.8)до метки и
перемешивают.
4.11.2 Смешанные градуировочные растворы
Готовят три смешанныхградуировочных раствораА. Ви С.содержащих кофеин, галловую кислоту
и катехины, которые используют в качестве внешних стандартов или маркеров. С помощью пипеток
переносят исходный раствор кофеина (см. 4.10.2). градуировочный раствор галловой кислоты
(см. 4.11.1) и исходные растворы индивидуальных катехинов (см. 4.10.4) в объемах, указанных в табли
це 2, втри отдельныемерныеколбывместимостью 20см3соднойметкой. Добавляютстабилизирующий
раствор (см. 4.8)до меткии перемешивают. Спомощью пипетки переносятпо 1.0 см3смешанного граду
ировочного раствора в маркированные флаконы, изготовленные из темного стекла. Осторожно проду
вают азотом, закрывают и хранят замороженными при температуре минус 20 °С. Номинальные
концентрации компонентов эталонных растворов А. В и С приведены в таблице 3.
3