ГОСТ ISO 14502-2—2015
4.2 Ацетонитрил класса для ВЭЖХ.
4.3 Метанол.
4.4 Кислота уксусная ледяная, класса для ВЭЖХ.
4.5 Метанол, водный раствор для экстракции объемной долей 70 %
Вносят 700 см3метанола (см. 4.3) в мерную колбу вместимостью 1дм3 с одной меткой, доливают
водой до метки (см. 4.1) и перемешивают.
4.6 Раствор ЭДТА, массовой концентрации 10 мг/см3
(1.00
±
0,01) гЭДТА (двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, дигидрат) помеща
ют в мерную колбу вместимостью 100 см3с одной меткой, доливают примернодо половины колбы теп
лой водой. Перемешивают до полного растворения ЭДТА, охлаждают раствор до комнатной
температуры, добавляют воду до метки и перемешивают.
Приготовленный раствор используют в течение одного дня.
4.7 Раствор аскорбиновой кислоты, массовой концентрации 10 мг/см3
(1.00
±
0,01) г L-аскорбииовой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3 с одной
меткой, доливают примерно до половины колбы водой. Перемешиваютдо полного растворения аскор
биновой кислоты, добавляют воду до метки и перемешивают.
Приготовленный раствор используют в течение одного дня.
4.8 Стабилизирующий раствор, состоящий из ацетонитрила объемной долей 10 %,
раствора ЭДТА массовой концентрации 500 мкг/см3 и аскорбиновой кислоты массовой
концентрации 500 мкг/см3
Используя пипетку, переносят 25 см3раствора ЭДТА (см. 4.6), 25 см3 раствора аскорбиновой кис
лоты (см. 4.7) и 50 см3ацетонитрила (см. 4.2) в мерную колбу вместимостью 500 см3с одной меткой,
доливают воду до метки и перемешивают.
Приготовленный раствор используют в течение одного дня.
4.9 Подвижные фазы
Меры предосторожности — Следует использовать сродства защиты глаз, перчатки и гото
вить реактивы в вытяжном шкафу.
4.9.1 Подвижная фаза А, состоящая из ацетонитрила объемной долей 9 %, уксусной кисло
ты объемной долой 2 %, раствора ЭДТА массовой концентрации 20 мкг/см3
180 см3ацетонитрила (см. 4.2) и40 см3уксусной кислоты (см. 4.4) переносятв мерную колбу вмес
тимостью 2 дм3с одной меткой, доливаютдо половины колбы воду идобавляют4.0 см3 раствора ЭДТА
(см. 4.6). Доводят водой до метки, перемешивают и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм (см.
5.10).
4.9.2 Подвижная фаза В. состоящая из ацетонитрила объемной долей 80 %. уксусной кисло
ты объемной долей 2 %, раствора ЭДТА массовой концентрации 20 мкг/см3
800 см3ацетонитрила (см. 4.2) и20 см3уксусной кислоты (см. 4.4) переносятв мерную колбу вмес
тимостью 1дм3с одной меткой, доливают примерно 100 см3воды, добавляют 2,0 см3раствора ЭДТА
(см. 4.6). Добавляют воду до метки, перемешивают ифильтруютчерезфильтр с размером пор 0.45 мкм
(см. 5.10).
4.10 Исходные стандартные растворы
4.10.1 Общие положения
Если имеются в наличии катехины известной чистоты, их можно использовать непосредственно в
качестве внешних стандартов. Помимо установленной чистоты класса «для ВЭЖХ». важно, чтобы
содержание влаги было также известно, поскольку высокие уровни содержания кристаллизационной
водынебудутучтеныпри хроматографическом измерении. Данныео чистотеисодержаниивлагивстан
дартных образцах, используемых в межлабораторном испытании, приведены в приложении В. Если
отсутствуют полные данные о чистоте или они не могут быть определены, то содержащие катехин реа
гентыследуетиспользоватьтолько в качестве маркерныхсмесей в целях идентификации. В этих случа
ях количественный состав может быть установлен с использованием внешних стандартов кофеина в
сочетании со значениями RRF индивидуальных катехинов (относительно кофеина), полученными в
межлабораторных испытаниях (см. 9.3 и [3]).
2