ГОСТ ISO 14502-2—2015
d)УФдетектор устанавливают на длину волны 278 нм. Необходимо обеспечить, чтобы диапазон
чувствительности детектора соответствовал пикам наиболее концентрированного стандартного рас
твора Сс учетом диапазона системы сбора данных.
8.6.3 Хроматографическое измерение
Кактолько скорость потокаподвижнойфазы (см. 4.9) итемпературастановятсястабильными, про
водят холостой опыт в условиях градиентного элюирования по 8.6.2. Затем вводят в колонку по 10 мм3
смешанных градуировочных растворов А. В и Сс последующим введением равного объема экстракта
пробы для измерения (см. 8.5). Введение смешанных рабочих градуировочных растворов повторяют с
регулярными интервалами (обычно после шести экстрактов пробы). Регистрируют данные, используя
систему сбора/интеграции данных (см. 5.12). для всех пиков смешанных градуировочных и
определяемых растворов.
После каждой серии тщательно промывают хроматографическую систему и колонку ацетонитри
лом с объемной долей 50 % (см. 8.6.1) и устанавливают на колонку заглушки, если ее отсоединяютдля
хранения.
8.6.4 Идентификация
Идентифицируютиндивидуальные катехины путем сравнения времениудерживания нахроматог
раммах измеряемых проб с соответствующими значениями на хроматограммах смешанных градуиро
вочныхрастворов при техже условиях хроматографического разделения (см. 8.6.2).Диодно-матричное
детектирование позволяет тщательно анализировать ультрафиолетовый профиль пиков катехинов и
определить чистоту пиков, что может быть особенно полезно для определения низких уровней
катехинов в черном чае.
П р и м е ч а н и е — Если возможность получения маркерных смесей катехинов ограничена, идентификации
способствует сравнение результатов измерения зеленого листового чая с типичной хроматограммой, приведенной в
приложении С.
9 Обработка результатов
9.1 Общие положения
Количественное определение проводят методом внешнего стандарта с использованием:
- стандартных образцов индивидуальных катехинов установленной чистоты и с известным содер
жанием влаги или
- стандартного образца кофеина вместе с согласованными значениями RRF индивидуальных
катехинов, измеренных относительно кофеина (см. 4.10.1 и 9.3).
9.2 Количественное определение с использованием стандартных образцов катехинов
9.2.1 Концентрацию компонента на безводной основе в каждом из смешанных градуировочных
растворов А. В и С (см. 4.11.2) вычисляют с точностью до 0.1 г/см3.
9.2.2 Строятлинейныйградуировочный графикдлякаждогокомпонента побезводным концентра
циям (мкг/см3) относительно площадей пиков, полученных с помощью системы сбора/интеграциидан
ных (см. 5.12), чтобы получить значение угла наклона и точки пересечения.
9.2.3 Содержание индивидуального компонента wc, выраженное в процентах помассе на основе
сухого вещества в пробе, вычисляют по формуле
^
_
(Sample ~Atifrfcapl)’^дтрл» ’d •100
•Шiampto 10000-iv0M.samp*
где Asampie — площадь пика, полученного для определяемого раствора:
^intercept— площадь пика в точке, где градуировочный график пересекает ось у;
Sample — объем экстракта пробы (50 см3 для растворимого чая и 10 см3 для листового чая), см3:
d — коэффициент разбавления (см. 8.5), обычно 5:
SsW — угол наклона градуировочного графика:
msampio — масса пробы для измерения, г;
wDM sampttf — массовая доля (содержание) сухого вещества в пробе, вычисленная по 8.2. %.
9.2.4 Общее содержание катехинов ivr. выраженное как массовая доля в процентах на основе
сухого вещества в пробе, вычисляют путем суммирования содержания индивидуальных катехинов
(см. таблицу 4)
wT = (% EGC) «■(% + С) + (% ЕС) * (% EGCG) + (% EGC).
7