ГОСТ 33539—2015
7.1.3.3 Приготовление загрузочного буферного раствора
В мерной колбе вместимостью 100 см3 с 7 см3 дистиллированной воды растворяют 0,025 г бром-
фенолового голубого и 3 см3глицерина.
Загрузочный буферный раствор используют немедленно, хранение не допускается.
7.1.3.4 Приготовление раствора бромистого этидия
В мерной колбе вместимостью 100 см3 со 100 см3дистиллированной воды растворяют 1 г броми
стого этидия.
Срок хранения раствора бромистого этидия в посуде из темного стекла в холодильной камере при
температуре от 2 до 5 °С — не более 12 мес.
7.1.3.5 Допускается использование готовых буферных растворов в соответствии с инструкциями
изготовителей.
7.1.4 Приготовление раствора для биологического теста на индикаторных растениях
7.1.4.1 Приготовление фосфатного буферного раствора молярной концентрации 0,03 моль/дм3, pH 8,5
В мерной колбе вместимостью 1000 см3 с 500 см3дистиллированной воды растворяют 3,5 г ди
гидрофосфата калия и 4,5 г хлорида натрия. Доводят pH до 8,5 с помощью смеси равных объемов
10%-ного раствора ортофосфорной кислоты и дистиллированной воды и перемешивают.
Срок хранения фосфатного буферного раствора в колбе в холодильной камере при температуре
от 2 до 5 °С — не более 10 сут.
7.1.4.2 Допускается использование готового буферного раствора в соответствии с инструкцией
изготовителей.
7.2Отбор и хранение проб и образцов
7.2.1 Правила отбора проб и образцов для серологических и молекулярных анализов
7.2.1.1 Для проведения серологических и молекулярных анализов на выявление вируса Т карто
феля у растений отбирают образцы молодых, но полностью развитых листьев на верхушке побега и
листьев со средней части побега растений длиной около 25 см в период непосредственно перед цвете
нием или во время цветения. Непосредственно для исследования используют терминальный листочек
сложного листа растения.
В культуре in vitro образцы листьев отбирают у энергично растущих растений в возрасте от четы
рех до шести недель и имеющих побеги длиной не менее 5 см.
Мериклоны каждой линии исследуют отдельно.
7.2.1.2 Для проведения серологических и молекулярных анализов на выявление вируса Т кар
тофеля у истинных семян растений отбирают от 30 до 50 семян каждого образца, хранившегося по
7.2.4.2, подвергают поверхностной стерилизации с применением этилового спирта концентрацией 70 % в
течение 10— 20 с или 1%-ного раствора гипохлорита натрия по 7.1.1.2 в течение 15 мин и индивиду ально
высаживают в пластиковые пробирки на питательную среду Мурасиге — Скуга. Затем отбирают не менее
20 сеянцев, развившихся из этих семян, и размножают в культуре in vitro.
7.2.1.3 Отбор проб клубней для серологических и молекулярных анализов проводят по 7.2.3.4 до,
во время или после уборки картофеля.
7.2.1.4 После отбора каждой пробы или образца инструменты (скальпель), используемые(ый) при
отборе, обеззараживают этиловым спиртом или хлорамином.
7.2.1.5 Пробы и образцы помещают в герметично закрывающиеся полиэтиленовые пакеты, в кото
рые вкладывают этикетку с указанием культуры, сорта, класса, фазы развития растения, происхождения
материала, идентификационного номера семян, места и даты отбора, а также фамилии специалиста, ото
бравшего пробу или образец, и направляют для последующей идентификации в соответствии с 8.3 и 8.4.
7.2.1.6 После отбора проб и образцов составляют акт, который подписывают представитель хо
зяйства и специалист, отобравший пробу или образец.
7.2.2 Правила отбора образцов для биологических тестов
Для проведения биологических тестов на выявление вируса Т картофеля отбирают образцы мо
лодых, но полностью развитых листьев растений на верхушке побега и листьев со средней части по бега
растений длиной около 25 см в период непосредственно перед цветением или во время цветения.
Для исследования одного мериклона возможно объединение листьев пяти растений.
7.2.3 Объем выборки проб и образцов
7.2.3.1 Объем выборки семенного картофеля составляет:
- исходные меристемные микрорастения — исследуют не менее 1 % растений от исходной линии,
отобранной для клонального микроразмножения in vitro;
9