ГОСТ 33539—2015
- тест-системы для проведения твердофазного ИФА вируса Т картофеля в модификации DAS-ELISA,
включающие в зависимости от изготовителя: планшеты полистироловые 96-луночные в комплекте с крыш
кой для закрывания или пленкой для заклеивания лунок, контроли положительные и отрицательные, специ
фические антитела, конъюгаты антител с ферментами-маркерами, буферные растворы и реактивы;
- перчатки одноразовые для лабораторных исследований;
- халаты лабораторные.
6.3 Для проведения исследования молекулярным методом по 8.4 используют:
- весы по ГОСТ OIML R 76-1 высокого класса точности с пределом допускаемой абсолютной по
грешности однократного взвешивания не более ± 0,0001 г;
- амплификатор под микроцентрифужные пробирки типа Эппендорф вместимостью 0,2 и 0,5 см3
со скоростью нагрева/охлаждения активного элемента не менее 1,5 °С/с;
- дозаторы одноканальные варьируемого объема от 10 до 500 мм3в комплекте со сменными одно
разовыми наконечниками по ГОСТ 28311;
- измельчитель лабораторный (гомогенизатор);
- измеритель pH диапазоном измерений от 0 до 14 ед. pH, имеющий минимальную чувствитель
ность 0,1 ед. pH;
- калия хлорид (калий хлористый) по ГОСТ 4234;
- камеру морозильную, способную поддерживать температуру до минус 80 °С по ГОСТ 26678;
- камеру холодильную диапазоном температур от 2 до 5 °С по ГОСТ 26678;
- микроцентрифугу-встряхиватель со скоростью вращения до 2000 об/мин;
- прибор для горизонтального электрофореза с комплектом кювет и гребенок;
- ПЦР-бокс или бокс ламинарный;
- ПЦР-детектор диапазоном длин волн от 470 до 580 нм;
- термостат твердотельный для микроцентрифужных пробирок типа Эппендорф диапазоном тем
ператур от 25 до 100 °С;
- трансиллюминатор ультрафиолетовый в комплекте с гельдокументирующей системой;
- центрифугу лабораторную для микроцентрифужных пробирок типа Эппендорф вместимостью от
1,5 до 2,0 см3, со скоростью вращения не менее 2000 об/мин, с функцией охлаждения;
- альбумин бычий сывороточный молекулярной массы 69000 г/моль, х. ч.;
- альбумин яичный, х. ч.;
- бромфеноловый голубой (краситель);
- воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
- глицерин по ГОСТ 6259;
- калия дигидроортофосфат (калий фосфорнокислый однозамещенный) по ГОСТ 4198;
- кислоту уксусную по ГОСТ 61;
- натрия гидрофосфат додекагидрат (натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный) по ГОСТ4172;
- натрия хлорид (натрий хлористый) по ГОСТ 4233;
- набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из растительных образцов;
- набор реагентов для проведения ОТ, включающий из расчета на один образец: 100 ед./мм3 обратной
транскриптазы вируса лейкемии мышей (ревертазы MMLV) — 2 мм3 (200 ед.); 5* буферный раствор для
синтеза первой цепи кДНК (гидрохлорида Трис молярной концентрации 280 ммоль/дм3, pH 8,7; хлорида
калия молярной концентрации 375 ммоль/дм3; хлорида магния молярной концентрации 30 ммоль/дм3) — 4
мм3; ДТТ молярной концентрации 20 ммоль/дм3 — 2 мм3 (40 ммоль/дм3); смесь из четырех дезоксину-
клеозидтрифосфатов (dNTP) (по 10 ммоль/дм3каждого) — 2 мм3(20 ммоль/дм3); 0,02 ммоль/дм3праймера
Oligo(dT)17— 0,5 мм3(0,01 ммоль/дм3); 0,02 ммоль/дм3праймера Random (dNJ10— 0,5 мм3 (0,01 ммоль/дм3);
РНК анализируемого образца — 5 мм3; воду стерильную — до 20 мм3.
Примечание — При использовании наборов реагентов с модифицированной ревертазой MMLV или об
ратной транскриптазой миелобластоза птиц (ревертаза AMV) состав и концентрацию ингредиентов реакционной
смеси корректируют в соответствии с инструкциями изготовителей;
- набор реагентов для проведения ПЦР, включающий из расчета на один образец: 5* мастер-микс,
содержащий Smart Taq-полимеразу; смесь из четырех дезоксинуклеозидтрифосфатов (dNTP), хлорида
магния и реакционного буферного раствора — 5 мм3; специфические праймеры — по 2 мм3 каждого
праймера (по 2 х 10~8 ммоль/дм3); синтезированную «ДНК — 4 мм3; воду стерильную — 12 мм3.
Примечание — При использовании наборов реагентов сдругими типами Taq-полимеразы состав и кон
центрацию ингредиентов реакционной смеси корректируют в соответствии с инструкциями изготовителей;
6