ГОСТ Р 57003—2016
9 Дополнительные исследования
9.1 Метод иммуноморфологии (иммуногистохимии, иммуноцитохимии)
Врач, выполняющий исследование, должен быть в равной степени компетентен как в традицион
ной диагностике, так и в ИГХ (ИЦХ) исследовании.
Решение о проведении ИМИ, равно как и выбор алгоритма исследования, принимается только по
сле выполнения морфологического (цитологического или гистологического) исследования и постановки
морфологического диагноза. Это решение морфолог (цитолог/гистолог) должен принимать совместно
с клиницистом, определив целесообразность выполнения ИМИ. То есть, если он предполагает возмож
ность различных вариантов ведения пациента, в зависимости от определенного результата ИМИ.
Таким образом, врач должен иметь конкретный и последовательный план не только обследования
больного, но и вероятные варианты его лечения в случае получения того или иного морфологического
или иммуноморфологического заключения.
Целесообразно в большинстве случаев использовать поэтапный алгоритм ИМИ в зависимости от
степени детализации диагноза, полученного при цитологическом или гистологическом исследовании1*.
ИМИ. выполненное ручным методом. — трудно стандартизируемый процесс2*, решение об ис
пользовании которого должно быть четко согласовано с администрацией ЛПУ.
9.1.1 Основой ИЦХ метода является иммунологическая реакция антигена и антитела.
9.1.2 Для ИЦХ исследования, направленного на уточнение диагноза, определение химиорези
стентности опухоли или проводимого с другой целью в интересах пациента или в рамках научного ис
следования. может быть использован нативный цитологический материал только в том случае, когда
заранее известно, что в препарате имеется достаточное количество сохранного материала, причем
именно того, который является предметом исследования, при условии, что имеющегося информатив
ного материала должно хватить (по мнению ответственного врача) для проведения полноценного ис
следования с заранее определенным алгоритмом.
Этим требованиям в полной мере могут соответствовать только препараты, приготовленные методом
ЖЦ на оборудовании, обеспечивающем хорошее качество иидентичностьсерии монослойных препаратов.
9.1.3 Принципиальная методика ИЦХ исследования при отсутствии в лаборатории иммуностей-
нера следующая:
- фиксация;
- маркированные препараты, приготовленные любым из способов, после замораживания или сра
зу после приготовления и подсушивания необходимо фиксировать в охлажденном в морозильной ка
мере ацетоне в течение 30 с;
- после фиксации подсушивать в течение 5 с.
В случав если используется препарат, приготовленный классическим (ручным) способом, обвести
исследуемое мини-поле препарата специальным иммуноцитохимическим карандашом для ограниче
ния и визуализации «рабочего поля» препарата и предохранения от растекания реактивов. Процедура
ИЦХ окрашивания выполняется по методике, предлагаемой компанией — производителем реактивов.
Стекла, после маркировки и фиксации, активно промывают в буферном растворе (например,
DAKO TBS, pH 7.2-7,6) в течение 10 мин (если иное не установлено производителем реактивов).
Так, при отсутствии уверенности (по результатам морфологического исследования) в гистогенезе опухо
ли и одновременно при значимости этой характеристики для дальнейшего ведения пациента целесообразно вы
полнить исследования, которые позволят получить ответ на этот вопрос. Наличие экспрессии СК 7 и/или СК 20
позволит высказаться о том, что исследуемая опухоль является аденокарциномой. При этом в клетках аденокар
циномы легкого экспрессия СК 7 чаше выражена, чем СК 20. а экспрессия СК 20 при отсутствии экспрессии СК 7 с
наибольшей вероятностью укажет на метастатический характер аденокарциномы. Чтобы уточнить органную при
надлежность этой опухоли, если это существенная информация в конкретной ситуации для определения тактики
ведения пациента, может оказаться достаточным проведение исследования с МКАТ TTF-1. TTF-1 положительная
экспрессия может наблюдаться в клетках большинства аденокарцином легкого и в клетках опухоли щитовидной
железы. Если морфолог не может уверенно исключить принадлежность исследуемой опухоли к щитовидной желе
зе. целесообразно выполнить исследование с МКАТ тиреоглобулином. Положительная экспрессия гиреоглобулина в
этом случав укажет на принадлежность опухоли к щитовидной железе. Отрицательная экспрессия — к легкому.
2* Иммуноморфологическое исследование — дорогостоящий, длительный, многоэтапный процесс, требу
ющий постоянного присутствия специалиста, со своей спецификой на каждом этапе исследования. Любая неточ
ность в исполнении протокола исследования влечет за собой искажение результатов исследования и делает его
бессмысленным.
8