ГОСТ EN 14663-2014
Растворяют 100 мг р-глюкозидазы (см. 4.14) в 10 см3 воды в конической
колбе, перемешивая в течение 2 мин.
Раствор готовят в день проведения анализа.
4.15.2 Проверка ферментативной активности р-глюкозидазы
Взвешивают 10 г свинины, 5 г картофельного пюре или 5 г муки из цельного
зерна в конической колбе и экстрагируют кислотой, как описано в 6.2.1. Добавляют
к 12,5 см3 раствора экстрагированной пробы 1 см3 раствора кислой фосфатазы (см.
4.13.1) и 1 см3 раствора р-глюкозидазы (см. 4.15.1) и перемешивают. Инкубируют
раствор в течение не менее 12 ч или в течение ночи при температуре 37 °С при
постоянном перемешивании. Данную операцию повторяют с двойным количеством
раствора р-глюкозидазы.
Определяют массовую концентрацию витаминов в соответствии с 6.6.
Ферментативная активность используемого фермента считается достаточной, если
значения массовой концентрации соединений витамина Вб в обоих растворах
пробы эквивалентны. На хроматограмме должен отсутствовать пик фосфата
пиридоксамина.
П р и м е ч а н и е - Для межлабораторного испытания использовали кислую фосфатазу
Sigma NrG-0395H.
4.16 Подвижная фаза для ВЗЖХ (серная кислота, c(H2S04) = 0,015
моль/дм3, содержащая 0,005 моль/дм3трихлоруксусной кислоты)
(817 ± 5) мг трихлоруксусной кислоты (см. 4.4) растворяют в 15 см3 серной
кислоты молярной концентрацией 1 моль/дм3 (см. 4.10), переливают в мерную
колбу вместимостью 1000 см3, обьем содержимого в колбе доводят до метки водой,
перемешивают и дегазируют.
4.17 Силиконовое масло для удаления пены.
4.18 Образцы сравнения
4.18.1 Общие положения
Пиридоксамин (РМ), пиридоксаль (PL) и пиридоксин (PN) могут быть
полученыуразличныхпоставщиков.Чистотаобразцовсравненияможет
варьироваться, поэтому необходимо определить их концентрацию и чистоту (см.
1) Данная жформация гриведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не
является рекламой указанного продукта со стороны CEN. Допускается использовать аналотчную
продукцию, если она позволяет получать со поста ви^ые результаты.
4