ГОСТ EN 14663-2014
3 Сущность метода
Производные витамина Вб (пиридоксаль, пиридоксамин и пиридоксин)
извлекают из пищевой продукции путем кислотного гидролиза, затем подвергают
ферментативному воздействию: дефосфорилируют, используя кислую фосфатазу,
и дегликозилируют, используя р-глюкозидазу.
ПолученныепроизводныевитаминаВбразделяютиколичественно
определяют методом ВЭЖХ с флуоресцентным детектированием ([1], [2]).
4 Реактивы
4.1 Общие положения
В ходе анализа используют только реактивы признанной аналитической
чистоты и воду не ниже первой степени чистоты в соответствии с EN ISO 3696 или
бидистиллированную воду.
4.2 Фосфат калия двузамещенный, массовая доля w (К
2
НРО
4
ЗН
2
О) £ 999 %.
4.3 Ацетат натрия безводный, w (ChbCOONa) £ 99,0 %.
4.4 Трихлоруксусная кислота (ТХУ), w (СЬССОООН) £ 99 Л %.
4.5 Раствор ацетата натрия молярной концентрацией с(СНзСООИа) =
2,5 моль/дм3
205 г ацетата натрия (см. 4.3) растворяют в 1 дм3воды.
4.6Реагентпослеколоночный(дополнительно),
К2НРО4
растворс
концентрацией с
(К2НРО4)
= 0,15 моль/дм3.
Растворяют 34,2 г фосфата калия двузамещеиного (см. 4.2) в воде, доводят
до 1000 см3, перемешивают и дегазируют.
4.7 Соляная кислота, с(НС1) = 1 моль/дм3.
4.8 Соляная кислота, с(HCI) = 0,1 моль/дм3.
4.9 Соляная кислота, с(НС1) = 0,2 моль/дм3.
4.10 Серная кислота, c(H2S04) = 1 моль/дм3.
4.11 Эфир петролейный, диапазон кипения от 40 °С до 60 °С.
4.12Фосфатазакислаяизкартофеля.Ферментативнаяактивность
составляет около 5 3 U/мгЧ
П и - датая единица измерения (международная или стандартная единица) определяется количеством
фермента, который катализирует трансформацию 1 мкмоль субстрата вминуту при стандартных уеловиях.
2