ГОСТ EN 14663-2014
Для проб пищевой продукции животного происхождения (свинина, молоко,
рыба и т. д.), которые не содержат р-глюкозилированного связанного пиридоксина,
ферментативнаяобработкар-глюкозидазойнеявляетсянеобходимой.
Лабораторные эксперименты показывают, что результаты определения общего
содержания витамина Вб в пищевой продукции, полученные с применением и без
применения р-глюкозидазы для ферментативной обработки, были приблизительно
одинаковыми (см. [2], [7]).
Отбирают пипеткой 12,5 см3 экстракта пробы по 6.2.1.2, 6.2.1.3 в коническую
колбу вместимостью 20 см3 и доводят pH до значения (4,8 ±0,1) ед. pH, используя
раствор ацетата натрия (см. 4.5). Добавляют 1 см3 раствора кислой фосфатазы (см.
4.13) и 1 см3 раствора р-глюкозидазы (см. 4.15) и перемешивают. Накрывают
коническую колбу и инкубируют раствор в течение не менее 12 ч или в течение
ночи при температуре 37 °С, постоянно перемешивая.
После охлаждения до комнатной температуры доводят pH до значения
приблизительно 3 ед. pH, используя серную кислоту (см. 4.10), переливают
отрегулированный раствор количественно в мерную колбу вместимостью 20 см3 и
обьем содержимого в колбе доводят до метки водой. Встряхивают и фильтруют
через сухой складчатый бумажный фильтр,удаляют первые 5 см3 фильтрата.
Подготовленный раствор пробы хранят до 3 сут в холодильнике при
температуре около 4 °С.
Перед хроматографическим анализом фильтруют аликвоту (приблизительно
2 см3) через мембранный фильтр (см. 5.6) и разбавляют подвижной фазой, если
необходимо.
6.3 Подготовка «холостой» пробы
Отбирают пипеткой 12,5 см3 раствора соляной кислоты (см. 4.8) в коническую
колбу вместимостью 20 см3 и доводят pH до значения (4,8 ±0,1) ед. pH, используя
раствора ацетатанатриямолярнойконцентрацией 2 5моль/дм3 (см. 4.5).
Добавляют 1 см3 раствора кислой фосфатазы (см. 4.13) и 1 см3 раствора р-
глюкозидазы (см. 4.15) и перемешивают. Инкубируют раствор в течение не менее
12 ч или втечение ночи при температуре 37 °С при постоянном перемешивании.
После охлаждения до комнатной температуры доводят pH до значения
приблизительно 3 ед. pH, используя серную кислоту (см. 4.10), переливают
количественно в мерную колбу вместимостью 20 см3, обьем содержимого в колбе
11