ГОСТ Р ИСО 11737-2-2003
При проведении испытаний на стерильность канала протекания жидкости в единице продукции этот
канал заполняется питательной средой, и единица продукции подвергается инкубации.
A.S.3 Извлечение микроорганизмов
А.5.3.1 Общие положения
Методы, с помошью которых микроорганизмы извлекаются из продукции механически перед их
перемещением в условия культивирования, в свою очередь могут быть разделены следующим образом:
a) смыв с последующей мембранной фильтрацией;
b
) смыв с последующим культивированием смывной жидкости.
Начальным действием для этих методов является извлечение микроорганизмов из слинииы продукции
или ЧПИ теми же методами, что и при оценке бионагрузки по ГОСТ Р ИСО 11737-1, А.4.2.4.1—А.4.2.4.7.
Соответственно, требования к выбору подходящей смывной жидкости такие же. как при оценке
бионагрузки согласно ГОСТ Р ИСО 11737-1. А.4.2.5. А.4.3 и таблица А.2.
П р и м е ч а н и е —Метод может не обеспечить выделение всех микроорганизмов из единицы продукции.
После выделения микроорганизмов из единииы продукции или ЧПИ можно проводить испытания на
стерильность с помощью мембранной фильтрации или культивирования всей смывной жидкости.
А.5.3.2 Мембранная фильтрация
При испытаниях на стерильность с помощью мембранной фильтрации смывная жидкость проходит через
стерильный мембранный фильтр, обычно с размерами пор 0.45 мкм, под действием вакуума или давления.
Поверхности, которые находились в контакте со смывной жидкостью, споласкиваются дополнительной
стерильной смывной жидкостью или раствором, содержащим нейтрализатор, и смывной раствор пропускается
через мембранный фильтр (А.6.2.3). После этого:
a) питательная среда асептически переносится на фильтр либо
b
) фильтр асептически переносится в питательную среду.
Обе эти операции завершаются инкубацией.
А.5.3.3 Культивирование смывной жидкости
При испытаниях на стерильность методом культивирования смывной жидкости один подход заключается
н использовании питательной среды в качестве смывной жидкости, при этом после смыва питательная среда
перемешается в стерильные контейнеры на инкубацию.
Альтернативный подход заключается в том. что может быть выбрана смывная жидкость, нс поддержи
вающая рост микроорганизмов, которая после смыва смешивается в равных объемах с питательной средой
двойной концентрации в стерильных контейнерах и затем выдерживается в инкубаторе.
А.5.4 Выбор условий культивирования
Д.5.4.1 Международный стандарт по валидации и текущему контролю конкретного процесса стерилиза
ции может содержать рекомендации по условиям культивирования, используемым для испытания на стериль
ность.
А.5.4.2 Обычно при культивировании используют единую питательную среду с учетом предположения,
что она является оптимальной для культивирования аэробных и факультативных микроорганизмов, которые
могут выжить под воздействием стерилизующего агента. При использовании соево-казеиновой питательной
среды в качестве единой среды для аэробных и факультативных микроорганизмов культивирование обычно
проводится при температуре (30±2) *С в течение 14 сут. Для других сред следует рассмотрен» и другие режимы
культивирования.
П р и м е ч а н и е —Температура культивирования, рекомендуемая для испытаний на стерильность,
может быть ниже рекомендуемой для оценки бионагрузки. Испольхтванис более низкой температуры помогает
выявить повреждениыс иди ослабленные микроорганизмы.
А.5.4.3 Условия культивирования выбирают в следующих случаях:
a) соответствующий международный стандарт по валидации и текущему контролю конкретного процесса
стерилизации нс оговаривает используемую питательную среду;
b
) использование единых условий культивирования неприемлемо из-за вероятного наличия микроорга
низмов других типов, устойчивых к воздействию стерилизующего агента (например, вероятного присутствия
анаэробных микроорганизмов).
А.5.4.4 При выборе условий культивировании для приведенных здесь примеров необходимо учитывать
следующие факторы:
a) природу продукции;
b
) способ производства:
c) источник потснипальной микробиологической конгаминапии;
d) вероятные типы встречающихся микроорганизмов.
Данные по типам микроорганизмов, полученные при определении бионагрузки в соответствии с
ГОСТ F ИСО 11737-1. могут помочь при выборе условий культивирования.
А.5.4.5 Применяемые обычно условия культивирования приведены в таблице А.2.
7