ГОСТ ISO 11815—2015
Субстрат выдерживаютпри комнатной температуре в течение 30 мин.
Субстратхранят при комнатной температуре не более 4 ч или в холодильнике в течение 24 ч.
Значение pH приготовленного субстрата не регулируют, онодолжно составлять6,50 ед. pH.
9.2 Приготовление растворов контрольных образцов сычужных ферментов
9.2.1 Раствор контрольного образца сычужного фермента теленка
Во избежание попадания влагидо открытия пакетика с порошкообразным контрольным образцом
сычужного фермента теленка (5.5) доводят еготемпературудо 18 “С—22 °С.
Пакетик открывают и взвешивают (2,500 ± 0,001) г порошкообразного контрольного образца
сычужного фермента теленка, который затем количественно переносят в мерную колбу вместимостью
50см3(6.3). Добавляютот 15до20см3буферногораствора(5.1)исцельюрастворенияпорошкапереме
шивают путем взбалтывания, не допуская образования пены. Доводят объем до метки буферным
раствором (5.1)и вновь тщательно перемешивают.
9.2.2 Раствор контрольного образца сычужного фермента взрослой особи
Раствор готовят в соответствии с 9.2.1, используя вместо порошкообразного контрольного образ
ца сычужного фермента теленка (5.5) порошкообразный контрольный образец сычужного фермента
взрослой особи (5.6).
9.3 Приготовление рабочих растворов контрольных образцов сычужных ферментов
теленка и взрослой особи
9.3.1 Рабочий раствор контрольного образца сычужного фермента теленка
В мерную колбу вместимостью 50 см3(6.3) помещают3 см3раствора контрольного образца сычуж
ного фермента теленка(9.2.1), отобранные пипеткой (6.2). Доводятобъем буферным раствором (5.1)до
метки итщательно перемешивают.
При этом коэффициент разбавления равен 333,33. Время свертывания молока под действием
рабочего раствора контрольного образца сычужного фермента теленка должно быть в диапазоне от
350 сдо 550 с.
Хранят рабочий раствор контрольного образца сычужного фермента теленка при комнатной
температуре в течение 24 ч. Допускается хранить рабочий раствор при температуре от 0 °С до 5 еС в
течение 2 сут.
9.3.2 Рабочий раствор контрольного образца сычужного фермента взрослой особи
Раствор готовят в соответствии с 9.3.1, используя вместо раствора контрольного образца сычуж
ного фермента теленка (9.2.1) раствор контрольного образца сычужного фермента взрослой особи
(9.2.2).
Коэффициент разбавления будет равен 333,33. Время свертывания молока под действием
рабочего раствора контрольногообразца сычужного фермента взрослой особи должно бытьв диапазо
не от350сдо 550 с.
Приготовленный рабочий раствор контрольного образца сычужного фермента взрослой особи
хранят при комнатной температуре в течение 24 ч. Допускается хранить рабочий раствор при темпера
туре от0 °Сдо 5 °С в течение 2сут.
9.4 Приготовление анализируемого раствора сычужного фермента
Из приготовленной анализируемой пробы (8.1 или 8.2) отбирают требуемое количество пробы
(для жидких проб — от 3 до 5см3,для порошкообразных проб — от 3 до 5г). Пробудля анализа разбав
ляют буферным раствором (5.1) до получения анализируемого раствора со временем свертывания,
близким временисвертывания рабочим раствором контрольного образцасычужного ферментателенка
или взрослой особи (9.3.1 или 9.3.2). с допустимым отклонением 140 с. Записывают конечный коэффи
циент разбавленияанализируемого раствора, т. к. он будетиспользован в расчетах (10.1).
9.5 Свертывание
9.5.1В сухую колбу или пробирку (6.8) пипеткой (6.2) вносят (25.010.1) см3 субстрата (9.1).
Субстратпомещаютв водянуюбаню (6.9). температуракоторойсоставляет32 °С. и нагреваютвтечение
неменее 12, нонеболее20мин, при этомсубстратперемешиваютпутемвращенияколбыилипробирки.
Ксубстратумикропипеткой (6.1) быстродобавляют0.5 см3рабочего раствора контрольногообраз
ца сычужногофермента теленка (9.3.1). одновременно включая секундомер (6.7). Содержимое переме
шивают, не допуская образования пены, и сразу же прикрепляют колбу или пробирку к вращающемуся
валу.
При появлении первых признаков коагуляции (появление хлопьев) в пленке субстрата на стенках
колбы или пробирки регистрируютвремясвертывания посекундомеру.
5