ГОСТ 24849— 2014
Приложение А
(обязательное)
Приготовление сред и реактивов
А.1 Приготовление питательного агара
Питательный агар готовят в стеклянной емкости из сухого препарата в соответствии с инструкцией
производителя.
Емкости с готовым питательным агаром должны быть закрыты силиконовыми или ватными пробками, а
сверху защищены колпачками из бумаги, пластика или фольги.
Питательный агар допускается хранить не более 1мес при температуре не ниже 2 °С и не выше 23 °С .
А.2 Приготовление растворов для разведений
А.2.1 Приготовление солевого (физиологического) раствора
8.5 г хлорида натрия растворяют в 1000 см3 дистиллированной воды. Значение pH раствора должно быть
равно 7.0 ± 0.1. Значение pH раствора контролирую! с использованием pH-метра. Раствор разливают в термостой
кие стеклянные емкости и стерилизуют при температуре (120 ± 2) °С в течение 15 мин. После стерилизации при
необходимости корректируют pH раствора: значение pH раствора должно быть 7.0 ± 0.1.
Срок хранения раствора при температуре не ниже 2 °С и не выше 23 °С — не более 1 мес.
А.2.2 Приготовление пептонного раствора
1 г пептона растворяют при кипячении в 1000 см3 дистиллированной воды. Значение pH должно быть равно
7.0 ± 0.1. Значение pH раствора контролируют с использованием pH-метра. Раствор разливают в стеклянные ем
кости и стерилизуют при температуре (120 ± 2) °С в течение 20 мин. После стерилизации при необходимости кор
ректируют pH раствора: значение pH раствора должно быть 7.0 ± 0.1.
Срок хранения раствора при температуре не ниже 2 °С и не выше 23 °С — не более 1 мес.
А.2.3 Приготовление пептонно-солевого раствора
8.5 г хлористого натрия и 1 г пептона растворяют при кипячении в 1000 см3 дистиллированной воды. Зна
чение pH должно быть равно 7.0 ±0.1. Значение pH раствора контролируют с использованием pH-метра. Раствор
разливают в стеклянные емкости и стерилизуют при температуре (120 ± 2) °С в течение 20 мин. После стерилиза ции
при необходимости корректируют pH раствора: значение pH раствора должно быть 7.0 ±0.1.
Срок хранения раствора при температуре не ниже 2 °С и не выше 23 °С — не более 1 мес.
А.З Приготовление среды Эндо
Среду Эндо готовят из сухого препарата по способу, указанному производителем.
Приготовленную и охлажденную до температуры 60 °С—70 °С среду Эндо после тщательного перемешива
ния разливают встерильные чашки Петри.
Среда, готовая к употреблению, не должна содержать следов влаги на поверхности.
Срок хранения чашек Петри со средой Эндо в стерильных светоизолирующих упаковках (например, пеналах
или обернутыми плотной стерильной бумагой) при температуре 4 °С— 10 °С — не более 7 сут.
А.4 Приготовление среды с тергитолом 7
Приготовление среды с тергитолом 7 проводят по ГОСТ 31955 (В1. приложение В) или из готового препарата
по способу, указанному производителем. Готовую среду вчашках Петри хранят в защищенном от света месте при
(5 ± 3) °С не более 10 сут.
А.5 Приготовление реактивов для оксидазного теста
Реактивы для оксидазного теста готовят по одному из вариантов:
Вариант 1:
тетраметил-л-фенилендиамин гидрохлорид — 0.1 г;
дистиллированная вода — 10 см3.
Реактив нестабилен и его необходимо готовить непосредственно перед испытаниями и сразу же использо
вать. Хранить реактив не допускается.
Вариант 2:
1 %-ный спиртовой раствор а-нафтола (раствор №1).
1 %-ный водный раствор димегил-л-фенилендиамина дигидрохлорида (раствор № 2).
Срок хранения растворов в емкостях изтемного стекла с притертыми пробками составляет: не более 1 мес —
раствора № 1; не более 7 сут— раствора № 2.
Перед использованием к 2.5 частям раствора N9 1добавляют 7.5 частей раствора № 2.
П р и м е ч а н и я
1 Реактивы являются канцерогенными. Работу по приготовлению реактивов следует выполнять, используя
маску и защитные перчатки, избегая контакта реактива с кожей.
2 Для постановки оксидазного теста допускается использовать готовые тест-системы.
18