ГОСТ 24849—2014
При отсутствии роста колоний на фильтрах или наличии отрицательной реакции на образование
индола (отсутствие изменения цвета колоний) в протоколе испытаний записывают: «Бактерии Е. coli в
100 см3 пробы воды не обнаружены».
Оформление результатов — по 7.1.1.5.
П р и м е ч а н и я
1 Использование коммерческого реактива Ковача на водной основедает более четкие и быстрые результаты
без применения ультрафиолетового облучения.
2 Неравномерное распределение колоний микроорганизмов на фильтре или обильный рост сопутствующих
микроорганизмов могут мешать идентификации колоний микроорганизмов с положительной реакцией на образо
вание индола из-за диффузии окраски в прилегающие колонии микроорганизмов.
7.1.5 Определение колиформных бактерий и Е. coli ускоренными методами с использова
нием готовых питательных сред на подложке
Для ускоренного определения колиформных бактерий и Е. coli применяют готовые питательные
подложки, например летрифильмы серии Aqua по методическим указаниям [1] и другие тест-системы,
имеющие сертификат и разрешение на применение.
П р и м е ч а н и е — Необходимо перед использованием петрифильмов в полевых условиях проверить
сопоставимость результатов в сравнении с методами, применяемыми в стационарной лаборатории. В случае по
лучения достоверных различий по критерию Стьюдента более чем в80 % полученные результаты следует отнести к
ориентировочным.
7.1.5.1 Проведение анализа
Подложку с питательной средой готовят к анализу в соответствии с технической документацией
производителя и соблюдением правил стерильности.
Для определения колиформных бактерий и Е. coli в воде используют мембранную фильтрацию.
Пробы воды фильтруют по 6.4. Фильтры стерильным пинцетом накладывают на подложку и помещают в
инкубатор или термостат. Посевы инкубируют при температуре 36 °С в течение 18—24 ч.
Колиформные бактерии в зависимости от использованной тест-системы, определяют по следую
щим признакам — характерному цвету колоний, изменению цвета среды вокруг колоний. Наличие га
зообразования под пленкой петрифильма также подтверждает присутствие в пробе воды колиформных
бактерий.
Для определения Е. coli при использовании петрифильмов одновременно с ростом бактерий учи
тывают газообразование, что исключает дополнительный этап их идентификации.
Тест-системы, в состав питательных сред которых входит хромогенный субстрат, позволяют выя
вить специфическую ферментативную активность анализируемых бактерий (глюкуронидазную — для
бактерий Е. coli, В-галактозидазную — для колиформных бактерий) по характерной окраске их колоний,
что позволяет в первичном посеве подсчитать число колоний этих бактерий и получить
окончательный ответ через 18—24 ч.
Оксидазный тест для выявления колиформных бактерий и Е. coli проводят по приложению Б.
7.1.5.2 Учет, обработка и оформление результатов — по 7.1.1.4 и .7.1.1.5.
П р и м е ч а н и я
1 Готовые тест-системы используют в полевых условиях при необходимости проведения анализа воды с
небольшим микробным загрязнением: их использование при работе в полевых условиях существенно сокращает
перечень необходимого оборудования при комплектовании лабораторий.
2 Использование тест-систем сокращает продолжительность анализа за счет исключения этапов подготов
ки посуды и приготовления питательных сред, стерилизации, розлива, разогрева и хранения питательных сред,
упрощает процедуру посева, в ряде случаев исключает процесс идентификации бактерий, способствует
защите персонала от вредною микробного воздействия и исключает контаминацию помещения, сокращает
трудозатраты при утилизации.
7.1.6 Определение колиформных бактерий и бактерий Е. coli сигнальным методом
Метод не требует фильтрования воды и наличия в комплекте лаборатории чашек с питательными
средами. Метод обеспечивает возможность получения только качественной оценки результатов. Для
проведения анализа используют навеску соответствующей среды для определения колиформных бак
терий или Е. coli в соответствии с прилагаемой инструкцией производителя.
В стерильные емкости наливают 100 см3 исследуемой воды, вносят навеску сухой среды и тща
тельно перемешивают до полного растворения. Посевы инкубируют в течение 10—24 ч при темпера
туре 36 °С.
13