ГОСТ 24849— 2014
П р и м е ч а н и е — Допускается при отсутствии в комплекте лаборатории термостата инкубировать посевы
при температуре 20 °С—25 °С втечение 48 ч.
После инкубации посевов проводят учет результатов, при этом считают, что:
- колиформмые бактерии и Е. coli отсутствуют, если цвет среды не изменился или отмечено по
мутнение без изменения цвета среды;
- бактерии обнаружены, если среда приобрела зелено-голубой цвет во всем объеме или верхнем
слое. При перемешивании цвет среды не должен измениться.
Для подтверждения наличия Е. coli в емкостях, в которых отмечено изменение цвета среды, вно
сят 2.5 см3 реактива Ковача (А.11. приложение А). Красное кольцо на поверхности среды подтверждает
образование индола, что свидетельствует о наличии Е. coli в пробе воды. Наличие Е. coli можно под
твердить также по свечению содержимого емкости в УФ-свете при использовании УФ-лампы (при на
личии флюорогенного субстрата в составе среды).
Оформление результатов — по 7.1.1.5.
П р и м е ч а н и я
1 Представленные методики позволяют в течение 24 ч оценить санитарное состояние водных объектов при
использовании минимально необходимого набора лабораторного оборудования, питательных сред и расходных
материалов в полевых условиях.
2 Вода в изучаемом объекте, в которой выявлено бактериальное загрязнение с использованием сигнальных
методов и результат превышает допустимые нормативы, подлежит дальнейшему анализу по 7.1.1 и 7.1.2 после
повторного отбора пробы.
При расследовании нештатных ситуаций эпидемического характера, а также при использовании
водоема для питьевого и хозяйственно-бытового водопользования или в качестве поверхностного ис
точника воды для централизованного водоснабжения помимо определения колиформных бактерий и
бактерий Е. coli проводят исследование отобранных проб воды на наличие патогенных энтеробактерий
(сальмонелл) используя экспедиционный метод посева в магниевую среду накопления по методическим
указаниям [2]. Для этого все компоненты магниевой среды в соответствии с прописью А.12. приложения
А. вносят в две емкости, содержащие по 500 см3 исследуемой воды. Каждый компонент тщательно
перемешивают до полного растворения и инкубируют в течение 24 ч при температуре (36
± 2)
°С.
После инкубации посевов из емкостей с признаками роста проводят высев на одну из плотных
сред: XLD — агар (А.13. приложение А) или хромогенную дифференциально-диагностическую среду
Рамбах-агар (А.14. приложение А) или другую разрешенную к применению среду. Посевы инкубируют в
течение 24 ч при температуре (36 ± 2) °С.
На дифференциально-селективной среде XLD сальмонеллы образуют колонии красного цвета с
черным центром за счёт образования сероводорода (H2S).
На среде Рамбах-агар сальмонеллы образуют колонии красного цвета. Колиформные бактерии
растут в виде сине-зеленых или сине-фиолетовых колоний. Остальные энтеробактерии и грамотрица-
тельные бактерии, такие как Proteus. Pseudomonas. Shigella вырастают в виде бесцветных или желто
ватых колоний.
Дальнейшую идентификацию выросших колоний при необходимости проводят по методическим
указаниям (2) в стационарной лаборатории.
7.2 Определение бактерий энтерококков
7.2.1 Опроделенио бактерий энтерококков с использованием мембранной фильтрации
7.2.1 1 Проведение анализа
Фильтруют 100 см3 пробы воды через мембранные фильтры с соблюдением требований 6.3 и 6.4.
После фильтрования фильтры переносят, не переворачивая, на авизованную плотную азидную среду
Сланеца-Бертли (А. 15. приложение А) или энтерококкагар (А.16, приложение А) и добиваются полного
прилегания его к среде без образования пузырьков воздуха. Чашки с посевами помещают в термостат
дном вверх и инкубируют при температуре (36 ± 2) °С в течение 24 ч.
При отсутствии роста колоний инкубацию посевов продолжают до 48 ч.
После инкубации посевов учитывают колонии, характерные для бактерий энтерококков, — выпу
клые. с ровными краями, темно-малиновые, розовые, светло-розовые, равномерно окрашенные или с
темно-красным не четко оформленным центром и подсчитывают их число.
Очень мелкие (на пределе видимости невооруженным глазом), плоские разных оттенков, ярко
малиновые с четко выраженным малиновым центром и бесцветным ободком колонии не учитывают.
14