ГОСТ 24849—2014
охлаждения воронку снимают, а на столик аппарата для фильтрования кладут фламбированным пинце
том стерильный мембранный фильтр и снова присоединяют фильтровальную воронку.
П р и м е ч а н и е — При использовании одноразовых стерильных аппаратов для фильтрования, указанные
выше процедуры по стерилизации фильтровального аппарата не проводят.
В воронку аппарата для фильтрования наливают отмеренный объем воды, затем создают разре
жение и отфильтровывают содержимое воронки.
После окончания фильтрования и осушения фильтра отключают вакуум, воронку снимают, фильтр
осторожно поднимают за край фламбированным пинцетом и переносят его, не поворачивая, на пи
тательную среду, разлитую в чашки Петри, добиваясь отсутствия пузырьков воздуха между средой и
фильтром. Поверхность фильтра с осевшими на ней бактериями должна быть обращена вверх.
При фильтровании 1 см3 пробы воды в воронку до внесения проб воды добавляют 4— 5 см3 сте
рильного раствора для разведения (А.2, приложение А), чтобы обеспечить равномерное распределе
ние бактерий на поверхности фильтра.
При посеве нескольких объемов из одной пробы воды фильтрование проводят через один аппа
рат для фильтрования без повторной стерилизации фламбированиом. В первую очередь фильтруют
меньшие, а затем большие объемы воды, используя для каждого объема отдельный фильтр. Перед
фильтрованием новой пробы аппарат стерилизуют фламбированием.
7 Проведение анализа
7.1 Определение колиформных бактерий и E.coli
7.1.1 Определение колиформных бактерий ускоренным методом с использованием мем
бранной фильтрации
7.1.1.1 Проведение анализа
При анализе питьевой воды системы централизованного водоснабжения и подземных источников
1-го класса по ГОСТ 2761 анализируют 300 см3 воды, пропуская этот объем не менее чем через два
мембранных фильтра.
При исследовании питьевой воды нецентрализованного водоснабжения и поверхностных источ
ников водоснабжения анализируют не менее 100 см3 воды, пропуская ее не менее чем через три мем
бранных фильтра, например пробы воды 1.0.10 и 100 см3.
При фильтровании воды неизвестного качества целесообразно увеличивать количество филь
труемых объомоа для получения изолированных колоний (например, выполняя посев по 1 см3 из 1-го
и 2-го десятикратных разведений). При этом объем воды для посева выбран правильно, если на одном
— двух мембранных фильтрах выросли изолированные колонии, среди которых не более 30 колоний
относятся к числу колиформных бактерий.
Для фильтрования используют стерильные мембранные фильтры, подготовленные по 6.3. Отме
ренные объемы воды фильтруют через мембранные фильтры с использованием аппарата для филь
трования и соблюдением процедуры по 6.4.
После фильтрования анализируемой воды мембранные фильтры размещают посевом вверх на
одну из селективных дифференциальных питательных сред (например, на фуксин-сульфитную среду
Эндо) (А.З. приложение А), разлитых в чашки Петри, добиваясь полного прилегания фильтров к среде
без пузырьков воздуха. Вместо среды Эндо допускается использовать лактозный агар с тергитолом 7
(А.4, приложение А).
П р и м е ч а н и е — Лактозный агар с тергитолом 7 допускается использовать только при исследовании
воды, в которой фоновая посторонняя водная микрофлора не мешает росту изолированных колоний колиформных
бактерий на фильтре.
На одну чашку допускается помещать несколько фильтров с условием, чтобы фильтры не сопри
касались. Маркировку профильтрованного объема воды наносят под фильтром с наружной стороны
дна чашки Петри.
Чашки с посевами помещают в термостат дном вверх и инкубируют при температуре (36 ± 2) °С
в течение 18 — 24 ч.
7.1.1.2 Учет результатов
После окончания инкубации посевов регистрируют в журнале испытаний отсутствие или наличие
на мембранных фильтрах колоний микроорганизмов.
9