ГОСТ Р 50396.0—2013
11.4.66 Агар яично-желточно-азидный
В 1000 см3дистиллированной воды растворяют при нагревании 10 г пептона, 3 г хлористого на
трия, 0.2 г фосфорнокислого двузамещенного натрия (дигидрофосфат). 15 г микробиологического ага
ра, 5,5 г мясного экстракта. При отсутствии мясного экстракта используют мясную воду (11.4.36), при
этом все компоненты растворяют в 1000 см3мясной воды. Устанавливают pH (7,6 ± 0.1) ед. pH.
Стери лизуют в течение 30 мин при температуре (121 ± 1) °С. охлаждаютдо температуры (50—60) X .
добав ляют 0,15 г азида натрия, смешивают, вновь стерилизуют в течение 30 мин при
температуре (121 * 1) X . После охлаждения до температуры (50 ± 1) X добавляют 150 см3
желточной эмульсии (11.4.23), смешивают и разливают в чашки Петри.
Срок хранения — не более 5 сут при температуре (4 ± 1) X .
11.4.67 Желатиновая среда
10— 15 г измельченного пищевого желатина добавляют в 100 см3 мясо-пептонного бульона
(11.4.37), растворяют при помешивании и медленном нагревании в водяной бане при температуре
(40—50) “С. После полного растворения устанавливают pH (7,1—7.3) ед. pH. Фильтруют через ват но-
марлевый или бумажный фильтр, разливают в пробирки по 5—7 см3, стерилизуют текучим паром по 20
мин два дня подряд.
После стерилизации среду охлаждают при строго вертикальном положении пробирок.
11.4.68 Среда Вильсон-Блера (агаризованная), измененная для анаэробов
1000 см3стерильно расплавленного и охлажденного до температуры (80 ♦ 1) “С питательного ага
ра добавляют 10 см3раствора сернокислого натрия (сульфит) массовой долей 100 г/дм3и 1 см3раство
ра железа (III) аммония сульфата массовой долей 50 г/дм3.
Срок хранения среды взащищенном отсвета месте при температуре (4 ± 1) °С — не более 7 сут.
Допускается приготовление среды Вильсон-Блера следующим образом: к 100 см3расплавленного
питательного агара добавляют 4 см3 раствора натрия сернокислого (сульфита) массовой долей 100
г/дм3и 1 см3раствора железа треххлористого массовой долей 80 г/дм3.
Готовая среда хранению не подлежит.
11.4.69 Среда железосульфитная
К 1000 см3дистиллированной воды добавляют 10 г триптона. 0,5 г сульфита натрия, 0,5 г железа
(III) цитрата. 15 г агара (при приготовлении агаризованной среды) или 1,5 г агара (при приготовлении
вязкой среды). Компоненты растворяют при нагревании, после чего охлаждают до температуры
(50 i 5) X . Устанавливают pH (7.1 ±0,1) ед. pH. Среду разливают в пробирки по 10—12 см3и стерили
зуют в течение 15 мин при температуре (121 ± 1) °С.
Триптон может быть заменен на равноценную навеску сухого панкреатического гидролизата казе
ина или на десятикратный объем жидкого панкреатического гидролизата казеина. Триптон и 1000 см3
дистиллированной воды могут быть заменены на 1000 см3мясной воды (11.4.36).
11.4.70 Среда Китт-Тароцци
Среду Китт-Тароцци готовят по ГОСТ 10444.1 со следующим дополнением: перед употреблением
среду регенерируют. Для этого пробирки со средой помещают в водяную баню и прогревают в течение 20
мин при температуре (100 • 1) X . Затем пробиркисо средойбыстро охлаждают водопроводной водой.
11.4.71 Селенитовая среда Лейфсона
Для приготовления среды готовят два раствора: А и Б.
Раствор А состоит из 5 гбактериологического пептона. 7 г фосфорнокислого двузамещенного без
водного натрия. 3 г фосфорнокислого однозамещенного натрия, 4 гхимически чистой лактозы, 1000 см3
дистиллированной воды, pH (7,0 ±0,1). Компоненты смешивают, разливают в стерильную посуду по
225 см3и стерилизуют текучим паром в течение двухдней по 30 мин или при температуре (112 ± 1) X в
течение 30 мин.
В раствор Б входит раствор кислого селенистокислого натрия с массовой концентрацией 10 %
(11.4.20), (готовят перед употреблением).
Перед началом работы к 225 см3раствора А стерильно добавляют 9 см3раствора Б.
11.4.72 Приготовление чашек со средой
Колбу с приготовленной и стерилизованной культуральной средой после прогрева среды помеща
ют в водяную баню при температуре от 44 X до 47 “С. перемешивают, разливают в стерильные чашки
Петри, дают затвердеть и подсушивают с открытой крышкой, соблюдая правила стерильности, пока по
верхность среды не будет сухой.
20