ГОСТ 32306-2013
ют раствором тиосульфата натрия молярной концентрации 0,05 моль/дмЗ. Индикатором служит 1 %-
ный раствор крахмала.
8.9.3 Обработка результатов
Массовую долю фенола Z. %. вычисляют по формуле
г = (2 5 .*- Г .« 1).0,00.568.100 %
2
где25 - объем бромистого калия, см3;
К - коэффициент поправки раствора бромистого калия;
Т - объем тиосульфата натрия, израсходованный на титрование, см3;
К, - коэффициент поправки раствора тиосульфата натрия;
0.001568 - коэффициент пересчета на фенол (1 см3 раствора тиосульфата натрия молярной
концентрации 0.05 моль/дм3эквивалентен 0.001568
г
фенола);
2 - объем испытуемой пробы, см3.
8.10 Определение стерильности
Стерильность туберкулина определяют методом прямого посева в соответствии с ГОСТ
28085 или методом мембранной фильтрации [1].
8.11 Определение реактогенности
У трех морских свинок массой не менее 400 г. не использованных ранее в опытах, удаляют с
боков волосяной покров, дезинфицируют кожу70%-ным раствором этилового спирта и внутри-
кожно вводят по 500 ME испытуемой пробы туберкулина в объеме 0,1 см3растворителя. Учет резуль
татов проводят через 24 ч.
8.12 Опроделенио безвредности
Общие принципы определения безвредности по ГОСТ 31926.
8.12.1 Проведение испытания
Двум морским свинкам, не подвергавшимся ранее действию агентов, которые могут помешать
тестированию, вводят подкожно 0.5 см3 испытуемой пробы туберкулина. За животными наблюдают в
течение 7 сут.
8.12.2 Учет результатов
Туберкулин считают безвредным, если в течение наблюдаемого периода не появляется ано
мальных эффектов (воспалительные реакции, гибель животных).
8.13 Определение остаточной инфекционности (отсутствие живых микобактерий)
8.13.1 Проведение испытания
Испытанию подвергают каждую пятую серию туберкулина. Для определения остаточной ин
фекционности используют морских свинок массой не менее 250 г, не реагирующих на введение ту
беркулина.
Не менее чем двум клинически здоровым морским свинкам внутрибрюшинно вводят 5 - 1 0 см3
испытуемой пробы туберкулина (не менее 5 мг сухого вещества на одну морскую свинку).
Примечание - С целью повышения вероятности выявления возможного присутствия живых
микобактерий допускается концентрирование испытуемой пробы туберкулина объемом 50 - 100 см3
методом мембранной фильтрации [1] или центрифугированием при 2000 g (2) - (3).
За животными наблюдают не менее 42 сут. отмечая случаи гибели или признаки заболевания.
Животных, павших в период срока наблюдения, вскрывают и обследуют макроскопически, а
ткани и органы с видимыми патологоанатомическими изменениями - микроскопически и культураль
ными методами для выявления возможного присутствия микобактерий.
Оставшихся в живых морских свинок, после эвтаназии вскрывают и обследуют макроскопиче
ски. В случае видимых патологоанатомических изменений дополнительно проводят микроскопиче
ские и культуральные исследования.
П р и м е ч а н и е - Организация-производитель может проводить контроль концентрирован
ного материала туберкулина непосредственно перед его разведением и расфасовкой (объем испы
туемой пробы концентрата - 5 см; на одну морскую свинку) [1].
8.13.2 Учет результатов
Туберкулин считают свободным от живых микобактерий, если все морские свинки остаются
живыми и клинически здоровыми в течение периода наблюдения, а в случае проведения дополни
тельных микроскопичес-ких и культуральных исследований живые микобактерии не выявляются.
8.14 Определение наличия сенсибилизирующих свойств
Исследованию подвергают каждую пятую серию туберкулина.
10