ГОСТ 32014—2012
6.4.8Приготовленные растворы хранят в морозильнике при температуре не выше минус 20 °С в
течение 1.5 лет. Перед применением растворы выдерживают при комнатной температуре втемном мес
те не менее 30 мин.
6.5 Построение градуировочной характеристики
6.5.1 Градуировочную характеристику строят при помощи матричной градуировки. Для этого про
водят обработку «чистых» проб («чистые» пробы выбирают среди пробтого же вида продукции, проана
лизированных тем же методом ранее, и не содержащих метаболитов нитрофуранов). приготовленных и
проанализированных ранее, не содержащих метаболитов нитрофуранов в соответствии с требования
ми раздела 7. в зависимости от типа исследуемой матрицы. На стадии перерастворения перед введени ем
в хроматограф в мерную пробирку вместимостью 5 см3 добавляют нитрофенильную смесь
метаболитов (см. 6.4.3) с таким расчетом, чтобы окончательные массовые концентрации находились в
пределахот 0.1 до 500 нг/см3.Затем добавляют50 мм3смеси нитрофенильныхдейтерировамных произ
водных (см. 6.4.7) и необходимое количество растворителя (см. 6.3.8), доводя объем до 1см3.
6.5.2 Для получения градуировочных данных используют не менее трех уровней концентраций
матричных градуировочных растворов. Определяемые ванализируемом образце массовые концентра
ции метаболитов нитрофуранов должны находиться вдиапазоне концентраций градуировочной харак
теристики.
6.5.3 При градуировке хроматографа анализируют матричные градуировочные растворы различ
ных уровней концентраций вусловиях, приведенныхв6.2.6.6. Затем, используя программноеобеспече
ние для сбора и обработки хроматографических данных, для метаболитов нитрофуранов
устанавливают градуировочные характеристики в виде зависимостей отношения площадей хромато
графических пиков соответствующего соединения к площади пика внутреннего стандарта от массовой
концентрации соединения в образце.
Построение графиков допускается проводить при помощи программы обработки данных
ВЭЖХ-МС/МС или при помощи программы Excel (Microsoft Office).
6.5.4 Вычисление площади пика проводят для каждого дочернего иона анализируемых соедине
ний. Допускается проведение количественных измерений по одному, наиболее интенсивному, дочерне
му иону. Для подтверждения наличия метаболитов нитрофуранов рассчитывают отношения площади
пика двух дочерних ионов для каждого соединения, которые должны соответствовать значениям,
указанным втаблице 1.
Т а б л и ц а 1— Параметры воздействия на ионы а режиме MRM и условиях электроспрея с регистрацией поло
жительных ионов
Метаболиты нитрофуранов
Ион предшественник, т/г
Дочерние ионы. т/х
2-НФ-АОЗ
236,2
134,0/104.1
2-H®-d4АОЗ
240.3
134.0/149.1
2-НФ-АМОЗ
335.2
291.1/262.1
с
2-НФ- 15АМОЗ
340.3
296,2/265.2
2-НФ-АГД
249.2
134.0/104.1
2-НФ-(С,3)3-АГД
251.9
133.9/179.1
2-НФ-СЕМ
209,2
191.9/166.0
2-НФ-1,2-М15.С,3-СЕМ
212.2
168.0/195.2
6.5.5Расчетные концентрации для обоих фрагментных ионов каждого метаболита нитрофуранов
должны совпадать в пределах 20 %.
Градуировочная зависимость считается приемлемой, если рассчитанноезначениеквадрата коэф
фициента корреляции для градуировочной кривой каждого фрагментного иона каждого метаболита
нитрофуранов не менее 0.98.
6.6 Хроматографические условия измерений
6.6.1Хромато-масс-слектрометр включают и настраивают в соответствии с техническим руковод
ством по его эксплуатации и устанавливаютследующие хроматографические параметры:
- скорость потока элюента — 300 мм3/мин;
- объем вводимой пробы — 10 мм3.
7