ГОСТ 31747—2012
4.2.4 Пробирки с подтверждающей средой инокулируют культурами из пробирок собогатительной
селективной средой двойной концентрации и культурами из пробирок с обогатительной селективной
средой нормальной концентрации, в которых отмечено образование газа и/или помутнение.
Посевы впробирках с подтверждающей средой инкубируют при температуре 37 °С 24 или 48 ч. по
сле этого в пробирках отмечают образование газа.
4.2.5 Наиболее вероятное число колиформных бактерий в 1см3или 1г пробы продукта (НВЧ) рас
считывают, исходя из числа пробирок с подтверждающей средой (4.2.4), показавших образование газа.
Для определения наиболее вероятного числа пользуются таблицей
ГОСТ 26670.
5 Методы определения количества колиформных бактерий — подсчет
колоний
Сущность методов
Методы определения количества колиформных бактерий посевом в
или
на агаризованиые се
лективно-диагностические среды основаны на высеве определенного количества продукта и/или его
разведений в или
на
агаризованную селективно-диагностическую среду с лактозой, инкубировании
посевов, подсчете типичных и атипичных колоний, пересеве типичных колоний и атипичных колоний
вжидкую селективную среду с лактозой для определения газообразования,
подтверждения, при не
обходимости. по биохимическим признаком принадлежности выделенных колоний к колиформным
бактериям.
5.1 Метод посева в агаризованную селективно-диагностическую среду
5.1.1 Для определения количества колиформных бактерий по 1 см3 продукта, если продукт
жидкий, или по 1 см3исходного разведения в случае другого продукта вносят вдве стерильные чаш ки
Петри.
Другую пару чашек используют для других количеств — исходной суспензии и/или десятикратных
разведений продукта.
Чашки с внесенным в них продуктом или его разведением заливают агаризованной питательной
средой.
Посевы в чашках инкубируют при температуре 37 вС в течение 24 ч.
5.
1.2 Типичные и атипичные колонии подсчитывают и определяют у бактерий из типичных и
атипичных колоний возможность ферментации лактозы.
5.1.3 Число колоний на 1 см3 или на 1 г продукта рассчитывают
по ГОСТ 26670.
исходя из числа
подтвержденных типичных и атипичных колоний, выросших на чашках.
5.2
Метод посева на агаризованную селективно-диагностическую среду
5.2.1 На подсушенную поверхность агаризованной свлвктив>ю-диаг>юстической среды в двух
чашках Петри наносят 0.1
—
0.2 см3продукта, если продукт жидкий, или исходной суспензии в случае
другого продукта.
Другую пару чашек используют для других количеств — исходной суспензии или десятикрат
ных разведений продукта.
Внесенный в чашки продукт или его разведения распределяют по поверхности агаризоватюй
питательной среды стерильным шпателем.
Посевы в чашках инкубируют при температуре 37 °С в течение 24 ч.
5.2.2 Типичные и атипичныеколонииподсчитывают и определяюту бактерийизэтихколоний
возможность ферментации лактозы.
5.2.3 Число колоний на 1см2или на 1г продукта посчитывают по ГОСТ26670. исходя из числа
подтвержденных типичных и атипичных колоний, выросших на чашках.
6 Питательные среды и реактивы
Химические вещества, используемые для приготовления питательных сред и реактивов, должны
быть аналитического качества.
6.1 Селективная обогатительная среда (лаурил сульфат триптозный бульон)
6.1.1 Состав среды приведен в таблице 1.
з